[发明专利]沉默两个抗性基因防治烟灰虱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及沉默两个抗性基因防治烟灰虱的方法。

背景技术

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)属同翅目，粉虱科，小粉虱属，又名棉粉虱或甘薯粉虱，在亚洲、欧洲、非洲、南美洲、中北美洲、大洋洲等大陆地区均有分布。烟粉虱寄主范围十分广泛，主要危害十字花科、茄科、葫芦科、豆科、菊科、锦葵科等植物。烟粉虱的危害主要来自于其成虫和若虫。烟粉虱成虫、若虫将口针穿过寄主植物细胞间隙深入韧皮部取食，直接刺吸植物汁液，导致寄主作物生长受阻，植株弱小；成虫产卵时卵柄直接插入叶组织内造成伤口为害；其若虫和成虫分泌蜜露，诱发煤污病，密度高时，叶片呈现黑色，严重影响光合作用。此外，烟粉虱还传播70种以上的病毒病，引起寄主作物病毒病流行，给农业生产造成了巨大的经济损失(A.Rami Horowitz，Yehezkel Antignus and Dan Gerling.Management of Bemisia tabaci Whiteflies.The Whitefly，Bemisia tabaci(Homoptera：Aleyrodidae)Interaction with Geminivirus-Infected Host Plants，2011，293-322，DOI：10.1007/978-94-007-1524-0_11)。

目前，杀虫剂是控制烟粉虱危害的重要手段。现在防治烟粉虱的常规药剂主要包括有机磷类(如毒死蜱、乙酰甲胺磷等)、氨基甲酸酯类(如灭多威、丁硫克百威等)、新烟酰类(吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺等)以及昆虫生长调节剂(噻嗪酮、蚊蝇醚)等杀虫剂。由于烟粉虱本身的生物学特性、杀虫剂用药的频繁性和盲目性等原因，烟粉虱在世界范围内已经对多种化学农药产生了抗性(Palumbo JC，Horowitz AR，Prabhaker N.Insecticidal control and resistance management for Bemisia tabaci.Crop Prot，2001，20：739-765)。对不同类型的杀虫剂，烟粉虱有着不同的抗药性分子机制。对抗吡虫啉的B型和Q型烟粉虱进行荧光定量PCR检测发现，烟粉虱体内的一个P450基因(CYP6CM1)表达量增加了17倍，从而使其对包括吡虫啉在内的新烟碱类杀虫剂产生抗性(Iris Karunker，Juergen Benting，Bettina Lueke，et al.Over-expression of cytochrome P450 CYP6CM1 is associated with high resistance to imidacloprid in the B and Q biotypes of Bemisia tabaci(Hemiptera：Aleyrodidae).Insect Biochemistry and Molecular Biology，2008，38：634-644)。烟粉虱对机磷类杀虫剂的分子抗性机制则可能涉及到羧酸酯酶介导的水解代谢作用的增强和乙酰胆碱酯酶发生点突变而对杀虫剂的敏感性降低。在抗有机磷类杀虫剂的B型烟粉虱中，羧酸酯酶基因(coe1)的表达量提高了4倍，同时，乙酰胆碱酯酶基因(ace1)在酰基的活性位点发生了突变，最终导致烟粉虱的抗药性增强(Alon M，Alon F，Nauen R，et al.Organophosphates′resistance in the B-biotype of Bemisia tabaci(Hemiptera：Aleyrodidae)is associated with a point mutation in an ace1-type acetylcholinesterase and overexpression of carboxylesterase.Insect Biochemistry and Molecular Biology，2008，38：940-949)。