[发明专利]肿瘤靶向光敏免疫偶联物的制备方法及其应用

权利要求书

1.酞菁锌-单克隆抗体肿瘤靶向光敏免疫偶联物的制备方法，其特征在于：利用单取代酞菁衍生物与单克隆抗体共价偶联，所述单取代酞菁衍生物是水溶性单羧基酞菁锌酰肼衍生物ZnPC-CO-5K-NHNH₂，所述的单克隆抗体是具有如下特征的单克隆抗体：1)分子量：150-170KDa；2)吸光特性：280nm具有特征吸收峰；3)生物学特性：单克隆抗体，能特异性识别肿瘤细胞表面生长因子受体，并与之发生抗原-抗体反应；所述制备方法包括：

1)将单羧基取代酞菁锌ZnPc-COOH与表面带有五聚赖氨酸的树脂反应，再用水合肼肼解，脱去保护基，形成水溶性单羧基酞菁锌酰肼衍生物ZnPC-CO-5K-NHNH₂；

2)抗体氧化：单克隆抗体在PH7.2的磷酸盐缓冲液中，加入终浓度10mM的高碘酸钠，25℃氧化30min后，加入终浓度10mM的抗坏血酸，将残留的高碘酸钠彻底还原成碘离子；

3)将氧化后的单克隆抗体与ZnPC-CO-5K-NHNH₂偶联，取氧化后的单克隆抗体与单羧基酞菁锌酰肼衍生物按摩尔比1∶10，溶于PH7.2的磷酸盐缓冲液中，混匀，4℃冰箱避光涡旋震荡过夜后，加入还原剂，4℃冰箱，反应4h，形成稳定偶联物。

2.酞菁锌-单克隆抗体肿瘤靶向光敏免疫偶联物的制备方法，其特征在于：利用单取代酞菁衍生物与单克隆抗体共价偶联，所述单取代酞菁衍生物是水溶性单羧基酞菁锌酰肼衍生物ZnPC-CO-5K-NHNH₂，所述的单克隆抗体包括曲妥珠单抗、西妥昔单抗或尼妥珠单抗；所述制备方法包括：

1)将单羧基取代酞菁锌ZnPc-COOH与表面带有五聚赖氨酸的树脂反应，再用水合肼肼解，脱去保护基，形成水溶性单羧基酞菁锌酰肼衍生物ZnPC-CO-5K-NHNH₂；

2)抗体氧化：单克隆抗体在PH7.2的磷酸盐缓冲液中，加入终浓度10mM的高碘酸钠，25℃氧化30min后，加入终浓度10mM的抗坏血酸，将残留的高碘酸钠彻底还原成碘离子；

3)将氧化后的单克隆抗体与ZnPC-CO-5K-NHNH₂偶联，取氧化后的单克隆抗体与单羧基酞菁锌酰肼衍生物按摩尔比1∶10，溶于PH7.2的磷酸盐缓冲液中，混匀，4℃冰箱避光涡旋震荡过夜后，加入还原剂，4℃冰箱，反应4h，形成稳定偶联物。