[发明专利]免疫原性组合物

说明书

本申请是申请号为200680023149.5、申请日为2006年6月23日的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含缀合到载体蛋白上的细菌荚膜糖，尤其是那些脑膜炎奈瑟氏球菌(N.meningitidis)糖。其还涉及包含这样的糖缀合物的疫苗和疫苗试剂盒、制备所述免疫原性组合物和疫苗的方法以及本发明疫苗和免疫原性组合物在治疗中的用途。其还涉及使用糖缀合物抗感染的免疫方法以及糖缀合物在制备药物方面的用途。

背景技术

脑膜炎奈瑟氏球菌是革兰氏阴性人感染性病原体，其能够引起细菌性脑膜炎。以有机体的荚膜多糖为基础，脑膜炎奈瑟氏球菌的十二个血清群已经得到了鉴定(A,B,C,H,I,K,L,29E,W135,X,Y和Z)。血清群A(MenA)是导致撒哈拉以南非洲地区的流行病的最常见原因。血清群B和C是导致发展中国家的大多数情况的原因，剩余的情况是由W135和Y引起的。

包含缀合到载体蛋白上的脑膜炎奈瑟氏球菌糖的免疫原性组合物是本领域已知的；载体蛋白具有将T细胞非依赖型多糖抗原转化为能够引发免疫记忆应答的T细胞依赖型抗原的已知作用。例如WO 02/58737公开了一种含有纯化的荚膜多糖的疫苗，所述纯化的荚膜多糖来自脑膜炎奈瑟氏球菌血清群A、C、W135和Y，并且是缀合到载体蛋白上的。然而，该申请教导所有的多糖必须基本上以同样的方式(通过相同的连接基连接到相同的蛋白载体上)进行缀合。

仍存在对开发改善的抗奈瑟氏脑膜炎缀合疫苗的需要。本发明涉及提供一种脑膜炎球菌多糖缀合疫苗，其中可以设计每种多糖的缀合方式(而不是统一的)以获得有效的组合疫苗。特别地，将某些脑膜炎球菌糖以高的糖：蛋白比例缀合到它们的蛋白载体上而其它的糖以低比例缀合是有利的。

发明内容

因此，在本发明的一个方面中提供了一种包含至少2种不同脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜糖的免疫原性组合物，其中一种或多种所述糖选自由缀合到蛋白载体上的MenA、MenC、MenY和MenW组成的第一组，其中糖：蛋白的比例(w/w)在1:2-1:5之间，一种或多种不同的糖选自由缀合到蛋白载体上的MenA、MenC、MenY和MenW组成的第二组，其中糖：蛋白的比例(w/w)在5:1-1:1.99之间。

在MenW疫苗中，Men W糖与载体蛋白的比例可以在5:1-1:1.99,2:1-1:1.99,1.5:1-1:1.8,1:1-1:1.7,1:1.2-1:1.6或1:1.4-1:1.5(w/w)之间。在MenY疫苗中，Men Y糖与载体蛋白的比例可以在5:1-1:1.99,2:1-1:1.99,1.5:1-1:1.9,1:1-1:1.8,1:1.1-1:1.6或1:1.3-1:1.4(w/w)之间。在MenA疫苗中，Men A糖与载体蛋白的比例可以在1:2-1:5,1:2.4-1:4,1:2.7-1:3.5或1:2.9-1:3.1(w/w)之间。在Men C疫苗中，Men C糖与载体蛋白的比例可以在5:1-1:1.99,2:1-1:1.99,1.5:1-1:1.8,1.3:1-1:1.6,1.2:1-1:1.4或1.1:1-1:1.2(w/w)之间，或者在1:2-1:5,1:2.5-1:4.5,1:2.7-1:4.3,1:3-1:4或1:3.3-1:3.5(w/w)之间。

缀合物中糖与载体蛋白的比例(w/w)是使用灭菌后的缀合物确定的。蛋白的量是使用Lowry试验(例如Lowry等人(1951)J.Biol.Chem.193,265-275或Peterson等人Analytical Biochemistry 100,201-220(1979))确定的，糖的量对于MenA来说是使用ICP-OES(感应耦合等离子体发射光谱)确定的，对于MenC来说是使用DMAP试验确定的而对于MenW和MenY来说是使用间苯二酚试验(Resorcinol assay)确定的(Monsigny等人(1988)Anal.Biochem.175,525-530)。

通过连接物缀合的糖通常比直接缀合到载体蛋白上时具有更高的载体蛋白结合。例如，在本发明的MenAC疫苗中，MenA糖可以通过连接物缀合到载体蛋白上而MenC直接地缀合。在MenCY疫苗中，MenC可以通过连接物缀合而MenY直接地缀合。在MenACWY疫苗中，MenA可以通过连接物缀合而MenCWY直接地缀合，或者MenAC可以通过连接物缀合而MenWY直接地缀合。