[发明专利]生产5’-核糖核苷酸的方法

说明书

本申请是发明专利申请200480002937.7的分案申请。

本发明涉及包含5’-核糖核苷酸的组合物和用于生产该组合物的方法。本发明还涉及包含5’-核糖核苷酸的组合物在食品或饲料中的应用。

自溶酵母提取物是对细胞进行破碎和对聚合酵母物质进行消化(裂解)之后从酵母中获得的可溶物质的浓缩物。细胞破碎之后培养基中释放出来的活性酵母酶是造成裂解的原因。通常上述类型的酵母提取物不包含5’-核糖核苷酸，因为在自溶过程期间，天然RNA已被分解或修饰，使其无法或几乎无法降解成5’-核糖核苷酸。富含氨基酸的上述类型的酵母提取物作为基本味道提供者被用于食品工业。酵母提取物中存在的氨基酸为食品增加了类似肉汤、肉汤味。

另一方面，水解酵母提取物是在下述处理之后从酵母中获得的可溶性物质的浓缩物，所述处理是：对细胞进行破碎、消化(裂解)以及在裂解期间向酵母悬浮物中加入蛋白酶和/或肽酶以及特别地，核酸酶。天然酵母酶在裂解之前被失活。该过程期间，形成了鸟嘌呤的5’-核糖核苷酸(5’-鸟嘌呤单磷酸酯；5’-GMP)、尿嘧啶的5’-核糖核苷酸(5’-尿嘧啶单磷酸酯；5’-UMP)、胸腺嘧啶的5’-核糖核苷酸(5’-胸腺嘧啶单磷酸酯；5’-CMP)和腺嘌呤的5’-核糖核苷酸(5’-腺嘌呤单磷酸酯；5’-AMP)。向混合物中加入腺苷酸脱氨酶后，5’-AMP被转化为5’-肌甙单磷酸酯(5’-IMP)。通过此种方法获得的水解酵母提取物因此富含5’-核糖核苷酸，尤其是富含5’-GMP和5’-IMP。通常酵母提取物还富含谷氨酸单钠(MSG)。5’-IMP、5’-GMP和MSG因其增强香味的特性而为人们所知。它们在某些种类的食品中能增加香喷喷的美妙味道。该现象被描述为“口感”或鲜味(umami)。富含5’-核糖核苷酸以及可选地，富含MSG的酵母提取物通常被加入到汤、酱、腌汁或香料调料中。

目前，富含5’-核糖核苷酸的酵母提取物是用具有高RNA含量的酵母菌株和/或通过对细胞内容物的部分提取来生产的。此类型的增味水解酵母提取物的缺点在于：由于氨基酸、短肽和其它酵母成分的存在，它们不适合需要纯净味道的应用。

JP 51106791描述了一种纯化RNA的方法，其中对酵母提取物进行超滤，接着是若干额外的纯化步骤。对于获得有商业吸引力的RNA来说所必需的一系列纯化步骤使得该过程复杂而又昂贵。在该篇文献中没有暗示将经纯化的RNA用于含有5’-核糖核苷酸的组合物的生产，所述5’-核糖核苷酸可被用作食品中的增味剂。

本发明的一个目的是提供含有高含量5’-核糖核苷酸的组合物，其在味道方面是纯净的，并可被用于若干食品或饲料上的应用。本发明的另一个目的是提供具有上述特征的含有5’-核糖核苷酸的组合物的简单而有效的生产方法。

发明内容

本发明提供了包含至少55％w/w(基于无NaCl的干重)5’-核糖核苷酸的组合物。优选地，该组合物包含至少65％w/w的5’-核糖核苷酸，更优选地，至少75％w/w的5’-核糖核苷酸。优选地，该组合物还包含谷氨酸盐。典型地，本发明的组合物包含至多98％w/w的5’-核糖核苷酸。

本发明还提供了一种非常简单、划算因此在商业上很具吸引力的方法。有益地，本发明的方法与从酵母提取物中对RNA的分离以及将经过分离的RNA向5’-核糖核苷酸的转化结合在一起。以这种方式，可能以相对简单并因此在商业上很具吸引力的方法生产出高纯度的5’-核糖核苷酸来。

本发明的方法可被用于生产本发明组合物。

特别地，本发明提供了用于生产含有5’-核糖核苷酸的组合物的方法，所述方法包括：

(i)处理微生物细胞，以释放出包含RNA的细胞内容物；

(ii)将存在于释放出的细胞内容物中的RNA与其它可溶性细胞物质分离；

(iii)将经过分离的RNA转化为5’-核糖核苷酸。

在此用术语“5’-核糖核苷酸”来指5’-GMP、5’-CMP、5’-UMP、5’-AMP和/或5’-IMP的混合物，其中混合物中的5’-IMP是通过将5’-AMP部分或完全转化成5’-IMP来获得的。

术语“5’-核糖核苷酸”在本文中指游离的5’-核糖核苷酸或其盐。