[发明专利]生脉注射液的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药注射剂的质量控制方法，具体是指生脉注射液的质量控制方法。本质量控制方法包括含量测定方法及特征峰的定性和定量方法。

背景技术

生脉注射液的处方源自古方生脉散，由红参、麦冬、五味子三味药材经过提取后制成的灭菌水溶液。该品种最初由华西医科大学研制，现收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十五册(WS3-B-2865-98)，2001年被列为国家中药保护品种。现阶段可生产生脉注射液的企业有十余家，已申请该品种中药保护的企业有8家。

由于其在临床上用于治疗气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气短、四肢厥冷、汗出、脉欲绝及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等具有上述证候者所取得的良好的效果。其应用也越来越广泛。但是随着临床研究的不断深入及国家关于中药注射剂安全性再评价工作的展开，对于生脉注射液的质量控制的研究越来越深入。

生脉注射液主要是由三味药红参、麦冬及五味子制成。其组成成分复杂，人参中的成分就分为9类，主要成分为皂苷、糖类。杨华元等用薄层扫描法测及采用薄层层析-比色法测定生脉注射液中有效成分人参总皂苷含量。

随着研究技术的不断发展，高效液相色谱法在测定物质的含量应用越来越广泛。王秀兰等采用高效液相色谱法测定生脉注射液中人参皂苷Rg1，Re的含量，色谱柱为用十八烷基硅烷键合相柱，流动相为乙睛一0.05％磷酸溶液(18∶82)，检测波长203nm，并对萃取方法进行了探讨。张梅等高效液相色谱法测定生脉注射液中人参皂甙Rb1的含量。其流动相为乙腈-甲醇-水(255∶744∶11)，用磷酸调pH至3.0，柱温30℃，流速为0.8ml/min，检测波长205nm，量程0.02A UFS。闻俐毓等用HPLC法测定生脉注射液中人参皂苷Re的含量，以C18柱，乙睛-0.05％磷酸(19∶81)为流动相，检测波长203nm。石雪萍等采用HPLC法测定生脉注射液中五味子醇甲的含量，流动相为甲醇-水(65∶35)为流动相，紫外检测波长254nm进行测定，柱温30℃，流速1.0ml/min。于敏等建立新生脉注射液中人参皂苷Rg2的含量测定方法，采用高效液相法，色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水(65∶35)，检测波长203nm，流速1.0ml/min，柱温为25℃。王琴等采用RP-HPLC测定生脉注射液中皂苷Rb1含量。张伶等建立测定生脉注射液中人参皂苷Rg1和Re含量的RP-HPLC分析方法.以RP-C18色谱柱为固定相，以乙腈-磷酸溶液(质量分数0.05％)(19∶81)为流动相，检测波长为203nm，流速为1.0mL/min。白晶等采用RP-HPLC法同时测定生脉注射液中人参皂苷及Rb1与五味子醇甲的含量。李章万等用3，5-二硝基苯甲酞氯(3，5-DNB)为衍生化剂，以高效液相色谱衍生化法测定红参及生脉注射液中人参二醇和人参三醇的含量，供试品经提取，水解和衍生化等处理后，测得红参中人参二醇及人参三醇的含量约为0.9％和0.5％；生脉注射液中分别约为0.7mg/ml和0.5mg/ml，甲醇-水(95∶5)为流动相，检测波长230nm。

在卫生部药品标准中药成方制剂第十五册(WS3-B-2865-98)生脉注射液标准中的含量测定规定了人参皂甙Re及Rg1的测定，根据以上研究还应该对其它成分的含量(例如五味子醇甲)进行测定。

随着指纹图谱技术在中药材质量控制中的应用，对于生脉注射液的指纹图谱的也有研究。夏晶等以Waters symmetryshield TM-RP18(4.6mm×250mm；5.0μm)色谱柱为分析柱，以乙腈(A).水(B)为流动相，梯度洗脱，0～30min(B：100→90％)；30～40min(B：90→77％)；40～50min(B：77％)；50～85min(B：77→40％)；85～95min(B：40→0％)；95～105min(B：0％)；105～115 min(B：0→100％)；检测波长为203nm。：应用HPLC色谱法建立了生脉注射液(红参、麦冬、五味子)的指纹图谱。并应用LC-MS/MS法，以Waters symmetryshield TMRP-RP18(4.6mm×250mm；5.0μm)色谱柱为分析柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱；检测波长为203nm。离子阱质谱。对生脉注射液20个特征峰进行确认，使其中的10个特征峰得到了确认。目前该技术已经应用于生脉的质量控制。