[发明专利]一种多孢灵芝的选育方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多孢灵芝的选育方法，属于食用菌遗传选育技术领域。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)是祖国中医药宝库中的珍品，素有“仙草”之誉。古今药理与临床研究均证明，灵芝确有防病治病、延年益寿之功效。东汉时期的《神农本草经》、明代著名医学家李时珍的《本草纲目》，对灵芝的功效都有详细和肯定的记载。现代药理学与临床实践进一步证实了灵芝的药理作用，并证实灵芝多糖是灵芝扶正固本、滋补强壮、延年益寿的主要成分。现在灵芝作为药物已正式被国家药典收载，2005年美国药典正式收录了灵芝，同时它又是国家批准的新资源食品，无毒副作用，可以药食两用。

科学研究表明，灵芝的药理成分非常丰富，其中有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸(其中含有七种人体必须氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸(主要含延胡索酸)，以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。灵芝对人体具有双向调节作用，所治病种，涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统，尤其对肿瘤、肝病变、失眠以及衰老的防治作用十分显著。

灵芝的应用范围非常广泛。就中医角度辩证看，出于灵芝入五脏补益全身五脏之气，所以无论心、肺、肝、脾、肾脏虚弱，均可服之。灵芝所治病种涉及呼吸、循环、消化、神经、内分泌及运动等各个系统；涵盖内、外、妇、儿、五官各科疾病。就其根本原因在灵芝扶正固本，增强免疫功能，提高机体抵抗力的巨大作用。它不同于一般药物仅针对某种疾病起治疗作用，亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养的不足进行补充和强化，而是在整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活动，调节人体新陈代谢机能，提高自身免疫能力，促使全部的内脏或器官机能正常化。

灵芝孢子是灵芝在生长成熟期，从灵芝菌孔中弹射出来的极其微小的卵形生殖细胞，孢子淡褐色至黄褐色，大小只有5.2～6.9μm×8.5～11.2μm，是活体生物，更适合人体肠胃直接吸收。它凝聚了灵芝的精华，具有灵芝的全部遗传物质和作用。据测定它所含的灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、氨基酸、蛋白质等活性物质的量，是灵芝子实体的70倍。然而，传统的灵芝品种产孢量较低(产孢量一般仅为4％)，难以满足人们对灵芝孢子日益增长的需求；且灵芝出芝试验的时间较长(需耗时几个月)，使得多孢灵芝育种工作进展缓慢。

发明内容

目前用于生产的灵芝菌种分两类：一类主要是采收灵芝子实体的菌种，另一类主要是用来采集灵芝孢子粉的菌种。本发明的目的在于针对主要用来采集灵芝孢子粉的菌种提供一种新的灵芝品种遗传选育方法，选育出的灵芝品种可使其产孢量达8～16％，为一般灵芝品种(产孢量4％)的1倍以上，且选育出的多孢灵芝品种遗传及主要生产性状(产孢量)稳定，从而实现灵芝人丁种植由数量型向质量型的转变，提高灵芝的商品性状，同时缩短了多孢灵芝育种时间。

实现上述目的本发明采用的技术方案

本发明采用食用菌遗传选育技术，具体主要涉及常规选育(灵芝组织分离法)，辅以现代生物技术中的孢子诱变育种，进行多孢灵芝遗传选育技术研究，主要包括如下5个步骤：

1)亲本选择

从全国各地采集品质优良、产孢量较高的灵芝品种作为多孢灵芝的培育亲本；

2)常规选育

将步骤1)培育亲本通过灵芝组织分离法分离培养获得菌丝体，经过栽培试验，筛选获得产孢量较高的灵芝品种(灵芝组织分离法即采用灵芝的幼蕾或菌盖幼组织进行分离，获得纯菌丝的方法。它们具有较强的再生能力和保持亲本种性的能力，属于无性繁殖范畴。组织分离取材广泛、操作简便、易于成功，是灵芝纯菌种的简便分离方法)；

3)诱变处理

将步骤2)得到的灵芝品种孢子制成孢子悬浮液，通过紫外线诱变处理：诱变处理应在暗箱内进行，箱内装15w紫外灯1支，悬挂于30cm高处，诱变处理时应先开灯20min，使波长稳定，然后将孢子悬浮液倒入直径为6cm的无菌培养皿中，打开皿盖，照射时间1～3min；用无菌水将照射后的孢子悬浮液稀释1000倍以上，再取稀释液0.2ml涂布于马铃薯琼脂培养基的培养皿上，在25℃下培养5～10d，就能在每个平板上得到数十个单菌落，选纯正、健壮的单个菌落移入斜面试管内，一个菌落只接一支斜面，待斜面菌丝长好后，再分别接入2～4瓶原种中，然后进行栽培试验，反复比较各菌落的生物学特性，择优留取；

4)品种筛选