[发明专利]一种还原酶及其基因、重组酶及制备方法和应用

权利要求书

1.一种还原酶作为催化剂在不对称还原前手性羰基化合物以制备光学活性手性醇中的应用；所述的还原酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的应用按下述方法进行：在pH 6-8的磷酸盐缓冲液中，在葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和NADP+的存在下，在如权利要求1所述的还原酶的作用下，将前手性羰基化合物进行不对称还原反应，制得光学活性手性醇。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的前手性羰基化合物为芳基酮类化合物或酮酯类化合物。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的芳基酮中的芳基为苯基或芳杂基。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的芳杂基为含有1～2个选自N、S和O的杂原子的五元或六元芳杂基。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的芳杂基为吡啶基。

7.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的前手性羰基化合物为如式1、2、3或4所示的前手性羰基化合物：

式1    式2    式3    式4

其中，R₁为-H、-Cl或-Br，R₁取代的位置为苯基的对位；

R₂为-CH₃、-CH₂Cl、-CH₂Br或-CF₃；

R₃为2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基；

R₄为-CH₃、-CH₂Cl、-CH₂Br或-CF₃；

R₅为-CH₃、o-Cl-C₆H₅-或-(CH₂)₂C₆H₅。

8.如权利要求3～7任一项所述的应用，其特征在于：所述的前手性羰基化合物在反应液中的浓度为1～15mmol/L；所述的还原酶或重组还原酶的用量为1～10U/L；葡萄糖脱氢酶的用量为10～100U/L；所述的葡萄糖的用量为5～50g/L；所述的NADP⁺的用量为0.5～1.0mmol/L；所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.05～0.1mol/L；所述的不对称还原反应的温度为20～35℃；所述的不对称还原反应的时间以反应完全为准。