[发明专利]中国鲎素组成型酵母表达载体及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201210051429.4 申请日: 2012-03-01
公开(公告)号: CN103233035A 公开(公告)日: 2013-08-07
发明(设计)人: 韩文瑜;冯新;雷连成;宋战昀;刁昱文;赵红蕾;高宇 申请(专利权)人: 吉林大学
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N15/66
代理公司: 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 代理人: 白冬冬
地址: 130062 吉*** 国省代码: 吉林;22
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摘要:
搜索关键词: 中国 组成 酵母 表达 载体 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种中国鲎素组成型酵母表达载体的制备方法,其特征在于:根据tachyplesins基因的测序结果设计引物TP I-NNX1和TP I-NNX2,含如下酶切位点:

上游引物TP I-NNX1:5’-CCGC|TCGAGAAAAGAAAATGGTGCTTCCGTGTTTG-3’

Xho I

下游引物TP I-NCX2:5’-GCT|CTAGATTAACGGCAACGACGGTAGCAG-3’

Xba I

根据pGAPZα使用手册合成通用引物:

上游引物5’ pGAP:5’-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3’

下游引物3’AOX1:5’-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3’

对TP I基因的克隆质粒pMD-18T-TP I和酵母表达载体pGAPZα A进行双酶切,回收酶切目的片段,用T4 DNA连接酶连接,连接产物转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性转化子,提取质粒,进行PCR和双酶切鉴定,并进行测序。

2. 由权利要求1的方法获得的中国鲎素组成型酵母表达载体pGAPZα A-TPI。

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