[发明专利]金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因PCR同步检测试剂盒有效
申请号: | 201210054205.9 | 申请日: | 2012-03-02 |
公开(公告)号: | CN102534041A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 陈历俊;刘继超;姜铁民;周伟明 | 申请(专利权)人: | 北京三元食品股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/445 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;王加岭 |
地址: | 100076 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金黄色 葡萄球菌 毒素 基因 pcr 同步 检测 试剂盒 | ||
1.金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因PCR同步检测引物,其为:
SEAB-F:5’-TGATAAATAYAAAGRKAAAWAMGTAG-3’,
SEAB-R:5’-GTTACACCACCATACATRCAAG-3’。
其中,Y为C或T,R为A或G,K为G或T,W为A或T,M为A或C。
2.含有权利要求1所述引物的金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因PCR同步检测试剂盒。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包含PCR缓冲液、dNTPs、无菌超纯水和Taq DNA聚合酶。
4.应用权利要求2或3所述的试剂盒检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素A、B基因的方法,其包括:
1)提取食品中的DNA;
2)以步骤1)提取的DNA为模板进行PCR反应;
3)对PCR产物进行电泳检测。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的PCR反应体系为:每20μl的反应液中,含有10-50ng的模板、20-30pM各上下游引物、10×PCR缓冲液2μl、0.15-0.25mM的dNTPs,1-1.5U的Taq DNA聚合酶,无菌超纯水补足体积。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的PCR反应条件为:95℃预变性4min,95℃变性30s,50~54℃退火30~60s,72℃延伸1min,共25~30个循环,最后72℃延伸10min。
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