[发明专利]一种乳酸片球菌CCFM7902及其用途

权利要求书

1.一种乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)CCFM7902，该菌菌株已于2011年11月29日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCC No.5493。

2.根据权利要求1所述的乳酸片球菌CCFM7902，其特征在于它具有下述性质：

(1)具有耐酸性，在pH3.0下能存活；

(2)具有耐胆盐能力，能耐受的胆盐浓度达0.3％；

(3)在体外对单核细胞增生李斯特菌生长具有抑制作用；

(4)对单核细胞增生李斯特菌在食品中的生长具有抑制作用；

(5)对单核细胞增生李斯特菌感染肠上皮细胞株HT-29细胞具有保护作用；

(6)对单核细胞增生李斯特菌感染小鼠的肝脾具有保护作用。

3.根据权利要求1所述的乳酸片球菌CCFM7902在使用含有该菌株的工作发酵剂生产青贮饲料与发酵香肠中的用途。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于在所述工作发酵剂中乳酸片球菌CCFM7902的浓度是10⁹cfu/g以上。

5.根据权利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的工作发酵剂是按照下述方法制备得到的：

按照以MRS液体培养基重量计1～2％接种量，将乳酸片球菌CCFM7902原始菌种接种于MRS液体培养基中，在温度37℃的条件下培养20-28h进行活化，连续以相同方式进行活化2-3代，得到活化培养物，然后按照以MRS液体培养基重量计1-3％接种量再接种于MRS培养基中，在温度37℃的条件下培养20-28h，接着在温度2-6℃与转速3500-4500r/min的条件下进行离心12-18min，去除上清夜，收集菌泥，然后，往所述的菌泥中加入冻干保护剂悬液，调整菌液浓度为10⁹cfu/ml，混匀后装入冻干瓶中，在温度 -80℃的条件下预冻2-6h，然后转入真空冷冻干燥机进行冻干，于是得到所述的工作发酵剂，它在温度4℃下保存。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述的冻干保护剂悬液是按照下述方法制备得到的：

将脱脂乳、海藻糖与去离子水按照重量比为1∶1∶8进行混合溶解，得到的溶液在温度115℃的条件下灭菌10min，得到所述的冻干保护剂悬液，它在温度4℃下保存。

7.根据权利要求3所述的用途，其特征在于所述的青贮饲料是按照下述步骤制备的：

首先，将青贮饲料原料揉切至1～4cm后待用。

然后，将0.5重量份根据权利要求5所述方法制备的工作发酵剂溶入到200-250重量份温度30℃-40℃的水中，搅拌溶解得到一种工作发酵剂悬液；

接着，把该工作发酵剂悬液喷洒到2000重量份的青贮饲料原料中，翻拌均匀，将青贮饲料原料的水含量控制在以重量计65％-75％；当饲料原料的水含量超过其范围时，让饲料原料在日光下晾晒，使其含水量达到其范围；当饲料原料的水含量低于其范围时，往其饲料原料中喷洒水，使其含水量达到其范围；

最后，把如此处理的青贮饲料原料装入青贮饲料桶中压实，然后密封，在常温下发酵3-4周后，得到含有乳酸片球菌CCFM7902的青贮饲料。

8.根据权利要求3或7所述的用途，其特征在于所述的饲料原料是一种或多种选自稻草、玉米秸秆、高粱秸秆、小麦秸秆、天然牧草、栽培牧草、田间杂草、菜叶类、水生植物或嫩枝树叶的青贮饲料。