[发明专利]马耳他布氏杆菌毒力相关基因有效
| 申请号： | 201210058155.1 | 申请日： | 2012-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN103131717A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 步志高;乔祖健;胡森;刘文兴 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12Q1/68;C12N15/74;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京市汉信律师事务所 11373 | 代理人： | 王文生 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 马耳他 杆菌 毒力 相关 基因 | ||
1.马耳他布氏杆菌延伸因子tuf基因，优选其为马耳他布氏杆菌的染色体I上的BM28_A1261(tuf-2)，更优选其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。
2.根据权利要求1所述的延伸因子tuf基因在区分马耳他布氏杆菌(Brucella Melitensis)疫苗株M5-90和它的亲本株M28中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其中所述延伸因子tuf基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。
4.一种区分马耳他布氏杆菌疫苗株M5-90和它的亲本株M28的方法，所述方法包括PCR扩增延伸因子tuf基因并对该基因进行测序的步骤，优选所述tuf基因为BM28_A1261(tuf-2)。
5.根据权利要求4的方法，其中如果所扩增的延伸因子tuf基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示，则指示该疫苗株是马耳他布氏杆菌疫苗株M5-90；如果所扩增的延伸因子tuf基因的核苷酸序列如SEQ ID No：2所示，则指示该疫苗株是马耳他布氏杆菌疫苗株M28。
6.一种将马耳他布氏杆菌强毒株毒力致弱的方法，该方法包括将马耳他布氏杆菌强毒株的延伸因子tuf基因突变失活的步骤，优选将马耳他布氏杆菌强毒株基因组中两个拷贝的延伸因子tuf基因(即tuf-1和tuf-2)之一突变失活，更优选所述tuf基因是位于染色体I上的BM28_A1261处的tuf基因拷贝(tuf-2)。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述马耳他布氏杆菌强毒株是羊马耳他布氏杆菌强毒株，优选羊马耳他布氏杆菌强毒株M28。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其中延伸因子tuf基因的突变失活是通过同源重组实现的。
9.根据权利要求8的方法，其中将抗生素基因通过同源重组替换延伸因子tuf基因，优选所述抗生素基因是卡那霉素抗性基因(Kanr)。
10.根据权利要求6-9中任一项的方法，其中所述马耳他布氏杆菌强毒株的延伸因子tuf基因的核苷酸序列如SEQ ID No：2所示。
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