[发明专利]一种对牛前体脂肪细胞进行体外培养的方法无效
| 申请号： | 201210060292.9 | 申请日： | 2012-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN102559589A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 刘晓牧;宋恩亮;刘桂芬;成海建;谭秀文;万发春;游伟 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人： | 韩百翠 |
| 地址： | 250100 *** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 牛前体 脂肪 细胞 进行 体外 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种对牛前体脂肪细胞进行体外培养的方法，其特征是，
a 无菌条件下取牛皮下脂肪组织，将其移入预先盛有D-Hanks液的平皿，漂洗5～8次，用眼科剪去除脂肪组织中可见的血管和结缔组织；
b 然后剪切组织块至8～10mm3小块，用组织匀浆机180～200r/min匀浆至乳糜状；继而加入0.1％胶原酶I培养基消化30min，其间每5min振荡1次；
c 经200目不锈钢细胞筛过滤去除未消化组织块及大体积的脂肪细胞，将细胞悬液移入离心管，2000r/min离心5min；弃去离心后的上清液，加入细胞培养液清洗1次，2000r/min离心10min，制成细胞悬液，显微镜下计数，以5×104cells/mL接种细胞至培养皿或培养瓶，置入37℃、饱和湿度、5％CO2培养箱中培养；
其中，步骤b中0.1％胶原酶I培养基为：将100mg胶原酶I溶解于100毫升D-Hanks液中，用5.6％NaHCO3溶液调节PH值至7.2～7.4，经0.22微米过滤器过滤、分装，-20℃保存备用；步骤c中细胞培养液为：在DMEM/F12液中添加其体积10％的胎牛血清，经0.22微米过滤器过滤、分装，4℃保存备用。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省农业科学院畜牧兽医研究所，未经山东省农业科学院畜牧兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210060292.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：基于材料强度差实现寿命差的破损安全拉索
- 下一篇：优质圆条式型煤的制备方法
