[发明专利]无寡肽的细胞培养基

权利要求书

1.一种无寡肽的细胞培养基，其包含至少0.5mg/L的多胺。

2.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述多胺选自于由尸胺、腐胺、亚精胺、精胺、胍基丁胺、鸟氨酸及其组合物所构成的组。

3.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述多胺通过合成方式制造。

4.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述多胺以约0.5～30mg/L的浓度存在于所述培养基中。

5.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述培养基不包含具有二十个以上氨基酸的寡肽。

6.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述培养基不包含具有三个以上氨基酸的寡肽，可选地包含谷胱甘肽。

7.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述培养基不包含具有两个以上氨基酸的寡肽，可选地包含谷胱甘肽和/或至少一种稳定形式的谷氨酰胺。

8.如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，其特征在于，所述培养基以化学方法进行限定。

9.一种用于培养细胞的方法，包括下述步骤：

(a)提供如权利要求1所述的无寡肽的细胞培养基，以及

(b)在培养基中增殖细胞从而形成细胞培养物。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述细胞选自于由哺乳动物细胞、昆虫细胞、鸟类细胞、细菌细胞、和酵母细胞所构成的组。

11.一种用于表达至少一种蛋白质的方法，包括下述步骤：

(a)提供细胞培养物；

(b)将至少一种包含编码至少一种蛋白质的序列的核酸序列导入所述细胞；

(c)选择携带所述核酸序列的细胞；以及

(d)在包含至少0.5mg/L的多胺的培养基中表达细胞中的蛋白质。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述培养基是如权利要求1所述的无寡肽的培养基。

13.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述蛋白质选自于由凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX、vWF、ADAMTS13和弗林蛋白酶所构成的组。

14.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述细胞是CHO细胞、293细胞或BHK细胞。

15.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述细胞/蛋白质组合选自于由CHO细胞/凝血因子VII、CHO细胞/凝血因子VIII、CHO细胞/ADAMTS13、CHO细胞/弗林蛋白酶、和293细胞/凝血因子IX所构成的组。

16.一种用于生产至少一种病毒的方法，包括下述步骤：

(a)提供细胞培养物；

(b)用至少一种病毒感染所述细胞；

(c)选择受病毒感染的细胞；以及

(d)在包含至少0.5mg/L的多胺的培养基中于细胞中增殖所述至少一种病毒。

17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述培养基是如权利要求1所述的无寡肽的培养基。

18.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述病毒选自于由痘病毒、冠状病毒、正粘病毒、副粘病毒、反向病毒、披膜病毒、黄病毒、肠道病毒、细小核糖核酸病毒、嵌沙样病毒、疱疹病毒、以及腺病毒所构成的组。

19.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述病毒选自于由牛痘病毒、SARS病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、慢病毒、罗斯河病毒、西尼罗河病毒、黄热病毒、FSME病毒、以及甲型肝炎病毒所构成的组。

20.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述细胞是Vero细胞或鸡胚细胞。

21.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述细胞/病毒组合选自于由Vero细胞/减毒牛痘、Vero细胞/牛痘、Vero细胞/甲型肝炎、Vero细胞/流感病毒、Vero细胞/西尼罗河病毒、Vero细胞/SARS病毒、Vero细胞/黄热病毒、鸡胚细胞/FSME病毒、以及鸡胚细胞/修饰牛痘病毒安卡拉(MVA)所构成的组。