[发明专利]一种快速构建复层细胞的方法

权利要求书

1.一种快速构建复层细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)将种子细胞和液态的细胞外基质凝胶混悬；

b)将液态混悬液置于构建载体上，使载体上的液态混悬液凝固成固态凝胶，直接形成复层细胞结构，然后加入培养液培养复层细胞至足够强度。

2.根据权利要求1所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的种子细胞是经过体外培养扩增或从组织块中新鲜分离得到。

3.根据权利要求1所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的细胞外基质凝胶是所需构建组织的细胞外基质蛋白、多糖和糖蛋白的混合物或单一成分所形成的凝胶。

4.根据权利要求1或3所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的液态的细胞外基质凝胶是通过控制细胞外基质凝胶的浓度和温度使其呈液态，其温度为20～37℃。

5.根据权利要求1所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的构建载体是利用天然组织脱细胞基质形成天然支架材料或是利用合成材料构建的高分子支架材料。

6.根据权利要求5所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的天然组织脱细胞基质为脱细胞角膜基质、脱细胞皮肤基质或脱细胞心脏基质。

7.根据权利要求1所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的将载体上的液态混悬液凝固成固态凝胶，其方法是降低混悬液的温度或使液态混悬液脱水以提高凝胶浓度或两者的结合来使液态混悬液凝固成固态凝胶。

8.根据权利要求7所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的降低混悬液的温度，其混悬液的温度为4～20℃。

9.根据权利要求7所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的使液态混悬液脱水以提高凝胶浓度是利用构建载体的吸水性实现液态混悬液的脱水从而提高凝胶浓度使液态混悬液形成固态凝胶或利用负压蒸发的方式脱水浓缩液态混悬液形成固态凝胶。

10.根据权利要求1所述的快速构建复层细胞的方法，其特征在于，所述的培养复层细胞是利用种子细胞的培养液进行培养，培养的方式包括静态培养、气液界面培养、连续灌注培养或者它们的组合。