[发明专利]基于无修饰抗体介导纳米金组装检测组蛋白修饰酶活性及筛选其抑制剂的生物传感方法无效
申请号: | 201210073840.1 | 申请日: | 2012-03-20 |
公开(公告)号: | CN102590509A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 甄珍;蒋健晖;楚霞;唐丽娟;俞汝勤 | 申请(专利权)人: | 湖南大学 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573;G01N21/33 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 马强 |
地址: | 410082 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 修饰 抗体 导纳 组装 检测 组蛋白 活性 筛选 抑制剂 生物 传感 方法 | ||
1.基于无修饰抗体介导纳米金组装检测组蛋白修饰酶活性及筛选其抑制剂的生物传感方法,包括如下步骤:
(1)组蛋白修饰酶底物肽的设计;
(2)组蛋白修饰酶底物肽与控制肽混合自组装的比例;
(3)采用基于无标记抗体介导修饰组蛋白修饰酶底物肽的纳米金组装的比色定量方法进行组蛋白修饰酶活性的定量检测以及相应抑制剂的筛选。
2.根据权利要求1所述的生物传感方法,其特征在于,组蛋白修饰酶底物的设计是由组蛋白修饰酶的识别底物肽加上由半胱氨酸组成的间隔肽组成。
3.根据权利要求1所述的生物传感方法,其特征在于,组蛋白修饰酶底物肽与控制肽混合自组装比例选择在1∶9到9∶1之间。
4.根据权利要求1的生物传感方法,其特征在于,所述组蛋白修饰酶的活性的检测及其抑制剂的筛选分析为:
对于组蛋白修饰酶活性的定量检测,检测步骤是:取所述组蛋白修饰酶底物肽与控制肽以权利要求3所述的比例混合自组装的纳米金置于微量管中;再于微量管中加入对应的组蛋白修饰酶与辅酶的混合溶液;然后加入所对应修饰位点的抗体反应,得不同颜色的反应产物;
对于组蛋白修饰酶抑制剂的检测,检测步骤是:取所述组蛋白修饰酶底物肽与控制肽以权利要求3所述的比例混合自组装的纳米金置于微量管中;再加入相应的组蛋白修饰酶与抑制剂的混合溶液,混合均匀后加入辅酶溶液;再加入所对应修饰位点的抗体反应,得不同颜色的反应产物。
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