[发明专利]肠杆菌科中沙门氏菌和志贺氏菌的快速筛选方法有效
申请号: | 201210074335.9 | 申请日: | 2012-03-20 |
公开(公告)号: | CN103320491A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
发明(设计)人: | 董根荣 | 申请(专利权)人: | 董根荣 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12Q1/34;C12Q1/37;C12Q1/44;C12R1/42;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州新源专利事务所(普通合伙) 33234 | 代理人: | 李大刚 |
地址: | 313012 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杆菌 沙门氏菌 志贺氏菌 快速 筛选 方法 | ||
1.一种肠杆菌科中沙门氏菌和志贺氏菌的快速筛选方法,其特征在于:将标本划线于麦康凯琼脂平板上,于36℃-38℃孵育18-20小时,然后检查平板上生长的无色菌落;挑出一个无色菌落,将其一部分用于检测氧化酶活性;另一部分接种于浸有色氨酸、焦谷氨酰-4-甲氧基萘胺和4-甲基伞形酮碘苯腈辛酸酯的滤纸条上,并用一滴水或缓冲液湿润;湿润后的接种条放置于保湿器皿中于36℃-38℃孵育2-3小时,然后将滤纸条置于Wood灯下检测荧光,荧光阳性表示C-8酯酶活性的存在;在纸条上滴一滴含有重氮染料和氯化铁的溶液,颜色变红表示不是沙门氏菌和志贺氏菌;有荧光但不变色表示是沙门氏菌;即无荧光又不变色表示是志贺氏菌。
2.按照权利要求1所述的肠杆菌科中沙门氏菌和志贺氏菌的快速筛选方法,其特征在于:滤纸的浸液量为:在1平方英寸的滤纸上浸有0.2-0.3ml含有色氨酸、焦谷氨酰-4甲氧基萘胺和4-甲基伞形酮碘苯腈辛酸酯各40-180微克的20mM Tris缓冲液,pH为7.5。
3.按照权利要求1所述的肠杆菌科中沙门氏菌和志贺氏菌的快速筛选方法,其特征在于:所用的滤纸是Whatman 3号。
4.按照权利要求1所述的肠杆菌科中沙门氏菌和志贺氏菌的快速筛选方法,其特征在于:所用的重氮染料是90-100μg/ml的深红色GBC盐,所用的氯化铁溶液浓度为12-13mg/ml。
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