[发明专利]一种用于全基因组或跨基因组沉默的长双链RNA表达载体有效
| 申请号： | 201210080027.7 | 申请日： | 2012-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN103320462A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 刘培;李天骄;唐秀文 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;王加岭 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 基因组 沉默 长双链 rna 表达 载体 | ||
1.一种用于全基因组或跨基因组沉默的长双链RNA表达载体，其特征在于，其为整合有以下序列的植物双元表达载体：终止子-启动子-LoxP位点序列-attP1位点序列-ccdB基因-CmR基因-attP2位点序列-LoxP位点序列-启动子-终止子。
2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述终止子为NOS终止子。
3.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述启动子为CaMV35S启动子。
4.一种用于全基因组或跨基因组沉默的长双链RNA表达载体，其特征在于，其为整合有以下序列的植物双元表达载体：NOS终止子序列-CaMV35S启动子-LoxP位点序列-attP1位点序列-ccdB基因-CmR基因-attP2位点序列-LoxP位点序列-CaMV35S启动子-NOS终止子序列。
5.根据权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述植物双元表达载体的出发载体为pTF101.1。
6.根据权利要求5所述的表达载体，其特征在于，其碱基序列如Seq ID No.1所示。
7.权利要求1-6任一项所述的表达载体在发掘新的基因功能或培育抗病虫植物新品种中的应用，其是利用该表达载体T-DNA边界序列间共轭的启动子序列及LoxP和attP位点序列，通过酶切反应或重组反应将植物或病虫cDNA文库整合至该载体，通过RNA干涉在植物中沉默植物基因或通过寄主输出来沉默病虫害基因，从而应用于植物功能基因组研究来发掘新的基因功能，或筛选可用于寄主输出的RNA干涉的靶标基因，进而培育出广谱或专一的抗病虫植物新品种。
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