[发明专利]重组微生物、重组载体及制备3-羟基丙酸的方法

权利要求书

1.重组微生物，包含：

将丙二酰基CoA还原成丙二酸半醛的酶，和

将丙二酸半醛还原成3-羟基丙酸(3-HP)的酶，使得该重组微生物能够由乙酰基CoA制备3-HP。

2.权利要求1的重组微生物，其中所述将丙二酰基CoA还原成丙二酸半醛的酶具有丙二酰基CoA还原酶(“mcr”)活性，和所述将丙二酸半醛还原成3-HP的酶具有丙二酸半醛还原酶(“msr”)活性。

3.权利要求2的重组微生物，其中所述mcr酶和msr酶是外源的。

4.权利要求3的重组微生物，其中所述mcr酶和所述msr酶源自勤奋金属球菌(M.sedula)。

5.权利要求1的重组微生物，进一步包含NADPH再生活性。

6.权利要求5的重组微生物，其中所述NADPH再生活性是转氢酶活性或甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性。

7.权利要求6的重组微生物，其中所述转氢酶活性是吡啶核苷酸转氢酶(“pntAB”)活性或可溶性吡啶核苷酸转氢酶(“udhA”)活性。

8.权利要求7的重组微生物，其中所述pntAB活性源自大肠杆菌(E.coli)。

9.权利要求6的重组微生物，其中所述甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性是gapN活性，且该gapN活性源自变异链球菌(S.mutans)。

10.权利要求1的重组微生物，其中所述重组微生物为选自以下的至少一种：发酵单胞菌属、埃希氏菌属、假单胞菌属、产碱杆菌属、沙门氏菌属、志贺氏菌属、伯克霍尔德氏菌属、寡养菌属、克雷伯氏菌属、毕赤酵母属、念珠菌属、汉逊酵母属、酵母属和克鲁维酵母属。

11.权利要求10的重组微生物，其中所述重组微生物为大肠杆菌、马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)或酿酒酵母(Sccharomyces cerevisiae)。

12.权利要求10的重组微生物，其中adhE、posB、pta、ack、frd和/或ldhA基因在该重组微生物中缺失。

13.重组表达载体，其为选自以下的至少一种：

包含mcr-msr基因的载体，

包含mcr-msr基因和pntAB基因的载体，

包含mcr-msr基因和gapN基因的载体，和

包含mcr-msr基因、pntAB基因、和gapN基因的载体。

14.制备3-羟基丙酸(3-HP)的方法，所述方法包括：

在产生3-羟基丙酸(3-HP)的条件下培养权利要求1-12任一项的的重组微生物。

15.根据权利要求14所述的所述方法，其中将所述微生物在包含选自葡萄糖、蔗糖、纤维素和甘油的至少一种碳底物的培养基上培养。

16.根据权利要求14所述的所述方法，进一步包括

分离所述3-HP。