[发明专利]甘蓝型油菜BnCP51启动子及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物基因工程和生物技术领域，具体涉及一种甘蓝型油菜BnCP51基因启动子(命名为P_BnCP51，以下相同)，同时还涉及一种甘蓝型油菜BnCP51启动子的制备方法。本发明还涉及含有该启动子或其实质同源核苷酸序列的载体和涉及利用该启动子在油菜及其它植物基因工程中的应用。

背景技术

植物基因启动子是位于结构基因5’端上游区、含有顺式作用元件的一段DNA序列，决定着下游基因转录的特异性、方向和效率，是基因转录调控机制和表达模式中最关键的因子。此外，外源基因在植物细胞中表达是植物基因工程研究的关键，而外源基因的表达首先取决于其转录的启动，在某种程度上，启动子决定了基因表达的时空顺序以及表达强度。因此，发掘和研究新型启动子对于基因表达调控机制研究和转基因研究具有非常重要的科学意义。

通过对多种植物基因启动子区的分析发现，绝大多数功能蛋白基因的启动子都具有共同的结构模式，一般由启动子核心元件和上游元件组成。位于转录起始位点上游-20--30bp处的TATA box为启动子核心元件，是富含有AT的保守序列区，与DNA双链的解链有关，并决定转录起始点的选择，是绝大多数植物启动子正确表达所必需的。TATA box上游的保守序列称为启动子上游元件，包括上游-75bp处的CAAT box和-80--110bp附近的GC box等一般上游启动子元件及其他特殊的上游元件，如茉莉酸类物质应答元件(JRE)、乙烯响应元件(ERE)等元件(张春晓等，植物基因启动子研究进展。遗传学报，2004，31(12)：1455-1464；路静等，高等植物启动子及其应用研究进展。自然科学进展，2004，14(8)：856-862)。CAAT box是比较保守的序列，与RNA聚合酶的识别和结合有关，对基因转录有较强的激活作用。然而有些基因无此框，如禾谷类作物的贮藏蛋白基因中无CAAT框而被CATC框代替。GC box的保守序列是5‘GGGCGG3’，可有多个拷贝，并能以任何方向存在而不影响其功能(路静，赵华燕，何奕昆，宋艳茹，高等植物启动子及其应用研究进展。自然科学进展，2004，14(8)：856-862；夏江东，陈在全，吴渝生，季鹏章，高等植物启动子功能和结构研究进展。云南农业大学学报，2006，21(1)：7-14)。只要具有了这些保守的结构框，那么就可以具有相应的启动下游基因表达的功能。