[发明专利]焦磷酸测序法检测他莫昔芬个体化用药基因多态性的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种焦磷酸测序法检测他莫昔芬个体化用药基因多态性的试剂盒，其特征在于，包括如下引物：

(1)扩增引物：

上游引物：5′-GTA GTG AGG CAG GTA TGG G-3′；

5′-GGA GAT TCA AAA GAT CCT GGA-3′；

下游引物：5′-CAG GAC CTC CTC CCT CAC CTG GTC-3′；

5′-TTC ATC TCC TTGAAC GAC G-3′；

其中，下游引物的5′进行生物素标记；

(2)测序引物：5′-GCA GGG GGC CTG GTG-3′；

5′-TGG AGT TTG TGG GGC-3′。

2.一种应用权利要求1所述的试剂盒检测他莫昔芬个体化用药基因多态性的方法，包括如下步骤：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶链反应：

配制50μlPCR扩增体系，包含：10×PCR buffr10.0μl，dNTP 3.0μl，上游引物1.0μl，下游引物1.0μl，rTaq1.0μl，水30.0μl，模板4.0μl；循环程序为：95℃5min预变性；依次在95℃30S，52℃30S，72℃30S，进行38个循环；72℃保持5min，最终保持在4℃，得扩增产物；

(3)焦磷酸测序单链样本纯化；

(4)焦磷酸测序及结果分析。