[发明专利]焦磷酸测序法检测OATP1B1基因多态性的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种焦磷酸测序法检测OATP1B1基因多态性的试剂盒，其特征在于，包括如下引物：

(1)扩增引物：

上游引物：5′-ACA CTC TCT TAT CTA CAT AGG TTG-3′；

下游引物：5′-GGT ACT ATG GGA GTC TCC CCT ATT-3′；

其中，下游引物的5′进行生物素标记；

(2)测序引物：5′-CAC GAA GCA TAT TAC CCA T-3′。

2.一种应用权利要求1所述的试剂盒检测OATP1B1基因多态性的方法，包括如下步骤：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶链反应：

配制50μlPCR扩增体系，包含：10×PCR buffer 5.0μl，dNTP 3.0μl，OATP1B1-上游引物0.5μl，OATP1B1(rs4149056)下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水39.5μl，模板1.0μl；循环程序为：95℃5min预变性；依次在95℃30S，55℃30S，72℃30S，进行35个循环；72℃保持5min，最终保持在4℃，得扩增产物；

(3)焦磷酸测序单链样本纯化；

(4)焦磷酸测序及结果分析。