[发明专利]一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法

权利要求书

1.一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法,其特征在于培养方法为：

(1)以盐碱土壤为嗜盐菌菌源,在温度为35~40°C，pH 7.5～8.5条件下用MGM培养基进行筛选培养2～3d，作为嗜盐菌菌源，冷藏保存；

(2)以黄河水为细菌菌源，在温度35~37°C，pH7.0～8.0条件下用苯酚培养基进行筛选培养16～24h，作为降酚细菌菌源，冷藏保存；

(3)把嗜盐菌放入饱和盐水中，电击6-8h，然后加热到60~70℃，加热3～5min，得到混合液，待冷却后PEG沉降，去除沉淀，保留上清液；

(4) 用CaCl₂溶液处理降酚细菌，然后把降酚细菌加入上清液中，涂抹于苯酚培养基上，在温度为35~37°C 条件下培养6-7d，作为转基因细菌菌源；

(5)把得到的转基因细菌涂抹于改良的苯酚培养基上在温度为35~40°C ，pH 7.5～8.5条件下培养3-4d筛选出转基因细菌。

2.根据权利要求1所述的一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法，其特征在于：所述的MGM培养基中以质量百分比计，含有牛肉膏0.2%~0.5%，蛋白胨1%~3%，NaCl 20%~25%，琼脂 1%~3%，CaCl₂ 0.1%~0.3%，甘油1%~3%，酵母提取物 1%~3%，饱和食盐水65%~75%。

3.根据权利要求1所述的一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法，其特征在于：所述的苯酚培养基中以质量百分比计，含有放线菌酚 1%~ 2% ，NaCl 2%~5%，延胡索酸铁2%~ 5%，甘露醇1%～3%，苯酚 10%~30%，蛋白胨1%~3%，饱和盐水57%~79%。

4.根据权利要求1所述的一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法，其特征在于：所述的改良苯酚培养基中以质量百分比计，含有放线菌酚 1%~ 2% ，NaCl 15%~20%，延胡索酸铁2%~ 5%，甘露醇1%～3%，苯酚 10%~30%，蛋白胨1%~3%，饱和盐水40%~65%。