[发明专利]牦牛源性纤维成分荧光定量PCR定性检测方法有效
| 申请号： | 201210096730.7 | 申请日： | 2012-04-05 |
| 公开（公告）号： | CN102634581A | 公开（公告）日： | 2012-08-15 |
| 发明（设计）人： | 唐敏峰;费静;杨娟;董正廉;王卫华;张小明;吴海珍;叶江 | 申请（专利权）人： | 上海出入境检验检疫局工业品与原材料检测技术中心;华东理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海华工专利事务所 31104 | 代理人： | 应云平 |
| 地址： | 200135 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 牦牛 纤维 成分 荧光 定量 pcr 定性 检测 方法 | ||
1.一种牦牛源性纤维成分荧光定量PCR定性检测方法，包括以下步骤：
步骤一、以牦牛绒的DNA为模板，进行PCR扩增；
步骤二、检测扩增产物的荧光信号；
其特征在于，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增牦牛源性纤维成分特异性引物对和牦牛源性纤维成分特异性探针。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扩增牦牛源性纤维成分特异性引物对的序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述牦牛源性纤维成分特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件如下：
反应体系：ABI Taqman universal PCR master mix(2×)10μl，DNA模板4μl，引物0.6μl，探针2.5μl，ddH2O 4.9μl；
反应条件：95℃，5min；95℃，15s，60℃，45s，40个循环。
5.一种牦牛源性纤维成分的检测试剂盒，含有以下试剂：
(a)扩增牦牛源性纤维成分特异性引物对；
(b)牦牛源性纤维成分特异性探针。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：
(c)标准参照物。
7.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性引物对的序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。
8.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
9.如权利要求5～8中任一项所述的试剂盒的应用，其特征在于，用于检测在纺织品中是否存在牦牛源性纤维成分。
10.一种如权利要求1所述的牦牛源性纤维成分荧光定量PCR的特异性引物和特异性探针，其特征在于，
所述特异性引物的序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；
所述特异性探针的序列如SEQ ID NO：3所示。
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