[发明专利]从催吐萝芙木中提取多种生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种医药技术领域的药物分离方法，具体是从植物催吐萝芙木(Rauwolfia vomitoria Afz.)中提取育亨宾(yohimbine)、阿吗灵(ajmaline)、蛇根碱(serpentine)、利血平(reserpine)、利新胺(rescinnamine)等5种生物碱的方法。

背景技术

萝芙木是夹竹桃科萝芙木属植物，含有多种药效成分。催吐萝芙木是萝芙木的一种，从非洲引进，其中含有利血平、阿吗灵、育亨宾、蛇根碱等多种生物碱，这些生物碱可作为药物，临床上具有对多种疾病的治疗作用。

经对现有技术文献检索发现，从萝芙木(包括催吐萝芙木)中提取药效成分，报道较多的是提取利血平，早期采用苯萃取，以后用大孔树脂提取。从催吐萝芙木中同时提取几种组分的报道，有提取利血平和育亨宾的研究，但提取出的育亨宾纯度较低(刘宇、冯蕾、赵凤生，药物生物技术，2008，15(5)：393-397)。还有从催吐萝芙木中同时提取利血平、利血匹林、萝芙木新碱的报道，但提取步骤较多，花费时间长(周雪晴、冯玉红、张冲、陈四利、林强，海南大学学报自然科学版，2008，26(2)：145-148)。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种从催吐萝芙木中一次最多可以提取5种生物碱的方法，用酸性乙醇浸提、大孔树脂吸附、弱酸性阳离子交换树脂提取、反相层析分离等技术相结合，提取出的生物碱均有较高的纯度。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明提供一种从催吐萝芙木中提取多种生物碱的方法，即同时提取育亨宾、阿吗灵、蛇根碱、利血平、利新胺；具体包括如下步骤：

(1)取催吐萝芙木根部粉碎而成的粉末，加入含酸的乙醇水溶液，搅拌、浸提、过滤，得到浸提液，照此程序重复2-3次；

(2)将所得的浸提液合并，减压加热浓缩，浓缩后的浸提液用非极性大孔吸附树脂吸附，然后用水洗涤树脂，随后用40％乙醇洗脱，收集洗脱液(记为A1)，再用80％乙醇洗脱，收集洗脱液(记为B1)；

(3)将上述收集的两部分洗脱液A1和B1分别减压加热浓缩，浓缩后的洗脱液A1用弱酸性阳离子交换树脂吸附，然后用水洗涤树脂，随后用50％乙醇洗脱，收集洗脱液(记为A2)；浓缩后的洗脱液B1用弱酸性阳离子交换树脂吸附，然后用水洗涤树脂，随后用50％乙醇洗脱，收集洗脱液(记为B2)；

(4)将上述收集的两部分洗脱液A2和B2分别用浓酸调节到pH 3左右，减压加热浓缩，浓缩后的洗脱液A2用C₁₈反相层析介质吸附，然后用乙醇水溶液洗脱，分段收集洗脱液(记为A3)；浓缩后的洗脱液B2用C₁₈反相层析介质吸附，然后用乙醇水溶液洗脱，分段收集洗脱液(记为B3)；

(5)将上述分段收集的洗脱液A3和B3用高效液相色谱仪测定其中各种生物碱的含量，将洗脱液A3中含育亨宾或阿吗灵并且纯度较高的部分分别合并；将洗脱液B3中含蛇根碱或利血平或利新胺并且纯度较高的部分分别合并；分别减压加热浓缩，至液体蒸干，加入有机溶剂结晶，得到育亨宾、阿吗灵、蛇根碱、利血平、利新胺的晶体。

步骤(1)中所述的含酸的乙醇水溶液，含有10％-60％的水(体积百分比)，同时含有酸，酸的浓度为0.02-0.2mol/L，酸可以是硫酸、盐酸或乙酸；

所述的浸提，每次加入的含酸的乙醇水溶液的体积mL为催吐萝芙木根部粉末干重g的3-10倍。

步骤(2)中，将所得的浸提液合并，减压加热浓缩，浓缩后的浸提液在常温下用非极性大孔吸附树脂吸附，非极性大孔吸附树脂的体积mL为催吐萝芙木根部粉末干重g的40％-50％，然后用水洗涤树脂，水的体积为非极性大孔吸附树脂体积的1-5倍，随后用40％乙醇洗脱，40％乙醇的体积为非极性大孔吸附树脂体积的2-5倍，收集洗脱液A1，再用80％乙醇洗脱，80％乙醇的体积为非极性大孔吸附树脂体积的2-5倍，收集洗脱液B1；

所述的用水洗涤树脂，是用去离子水或纯净水从柱的进口通入柱内，再从柱的出口流出，洗涤时间为0.5-3h；

所述的40％乙醇，其中含有体积百分比为59％的水及体积百分比为1％的盐酸；

所述的80％乙醇，其中含有体积百分比为19％的水及体积百分比为1％的盐酸。