[发明专利]一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法

权利要求书

1.一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，包括以下步骤： 

1）从黄芪粗粉中制备黄芪多糖提取液；

2）将步骤1）所得的黄芪多糖提取液进行分离得黄芪多糖粗品；

3）将步骤2）所得的黄芪多糖粗品纯化：采用中性蛋白酶将步骤2）所得的黄芪多糖粗品在40～60℃酶解30～60min，沸水浴6～9min灭酶，冷却至室温后，离心，除去变性酶沉淀，然后上柱、将洗脱液蒸干后得黄芪多糖纯品；

4）将步骤3）所得的黄芪多糖纯品硒化：

① 合成硒含量为1.5～3.8%的含硒试剂氯化亚硒酰；

 将黄芪多糖纯品加入到脱水吡啶中，搅拌分散均匀；然后滴入氯化亚硒酰和丁二酸，充分搅拌后加入钠含量为6～15%的硝酸钠溶液，在常温下硒化反应12～20h得悬浊液A，每千克所述黄芪多糖纯品的氯化亚硒酰用量为0.5～3L，每千克所述黄芪多糖纯品的吡啶用量为6～8L，每千克所述黄芪多糖纯品的丁二酸用量为0.3～0.5L；

③ 在悬浊液A中加入硫酸，搅拌6～9h，再用浓度为70～90%的无水乙醇沉淀离心2～5次；

④ 用水溶解沉淀后透析8～10h；

⑤ 再用无水乙醇沉淀离心，真空冷冻，用四氯化碳干燥后得粉末状硒化黄芪多糖。

2.根据权利要求1所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤1）为称取黄芪粗粉270.0g，用正丁醇溶剂按料液比1:6在100℃下浸渍浸提90min、连续浸提3次，抽滤得黄芪多糖提取液。

3.根据权利要求2所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤2）为加入5倍黄芪多糖提取液体积的、体积浓度为90%的乙醇进行沉淀分离，沉淀时间为4h，干燥得黄芪多糖粗品。

4.根据权利要求3所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤3）为采用中性蛋白酶将步骤2）所得的黄芪多糖粗品在40～60℃酶解30～60min，沸水浴6～9min灭酶，冷却至室温后，离心，除去变性酶沉淀，然后上AB-8大孔吸附树脂吸附，上柱流速为2ml/min，吸附12h，然后用30%乙醇洗脱，洗脱流速2ml/min，将洗脱液蒸干，得黄芪多糖纯品。

5.根据权利要求4所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤3）为采用中性蛋白酶将步骤2）所得的黄芪多糖粗品在55℃酶解40min，沸水浴8min灭酶，冷却至室温后，离心，除去变性酶沉淀，然后上AB-8大孔吸附树脂吸附，上柱流速为2ml/min，吸附12h，然后用30%乙醇洗脱，洗脱流速2ml/min，将洗脱液蒸干，得黄芪多糖纯品。

6.根据权利要求1所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤4）中的含硒试剂氯化亚硒酰的硒含量为3%。

7.根据权利要求1所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤4）的步骤②中的硒化反应时间为15～18h。

8.根据权利要求7所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤4）的步骤②中每千克黄芪多糖纯品的氯化亚硒酰硒化剂用量为1.2～2升。

9.根据权利要求8所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤4）的步骤④为用水溶解沉淀后透析8～10h。

10.根据权利要求9所述的一种有机法制备硒化黄芪多糖的方法，其特征在于：所述步骤4）的步骤④用水溶解沉淀后透析9h。