[发明专利]一种安全快速从血液中提取基因组DNA的方法无效
申请号: | 201210100069.2 | 申请日: | 2012-04-09 |
公开(公告)号: | CN102604935A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 邢秀梅;杨福合;査代明;荣敏;苏伟林;吴琼 | 申请(专利权)人: | 邢秀梅 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 陈宏伟 |
地址: | 131000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 安全 快速 血液 提取 基因组 dna 方法 | ||
1.一种安全快速从血液中提取基因组DNA的方法,包括以下步骤:
(1)取200-300份抗凝血和400-500份低盐缓冲液加入到离心管中充分混匀,室温下1000-1500 RPM离心8-12 min,弃上清;
(2)加入400-500份低盐缓冲液,充分混匀,室温下1000-1500 RPM离心3-8 min,重复上一步骤;
(3)吸出上清,加入300份细胞裂解液,移液器吹打混匀,60-70℃水浴8-12 min;
(4)加入70-80份饱和NaCl,充分混匀,室温下10000-12000 RPM离心3-8 min,将上清转移到离心管中;
(5)加入2倍体积室温下的无水乙醇,充分混匀,室温下10000-12000 RPM离心2-5 min,弃上清;
(6)加入400-600份冰浴的70%-80%乙醇,颠倒混匀数次,10000-12000 RPM离心1-5 min,弃上清;
(7)烘箱中60-70℃干燥5-15 min,加入80-150 μl ddH2O,60-70℃水浴10-20 min,-20 ℃保存。
2. 根据权利要求1所述安全快速从血液中提取基因组DNA的方法,其特征在于所述的试剂配制:
(1)低盐缓冲液(pH 7.6-7.8):12-13份Tris碱(三羟甲基氨基甲烷),32-35份 Na2EDTA(乙二胺四乙酸二钠),7-8份MgCl2,4-5份NaCl,余份为水;
(2)细胞裂解液:4-6份 SDS十二烷基硫酸钠,4-6份Triton X-100(聚乙二醇对异辛基苯基醚),1000份低盐缓冲液。
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