[发明专利]一种铁皮石斛无激素组织培养的方法无效
| 申请号： | 201210102034.2 | 申请日： | 2012-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN102613086A | 公开（公告）日： | 2012-08-01 |
| 发明（设计）人： | 杨岚;向增旭 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12N5/04 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛 |
| 地址： | 21009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 铁皮 石斛 激素 组织培养 方法 | ||
1.一种铁皮石斛无激素组织培养的方法，其特征在于该方法包括铁皮石斛种子萌发为圆球茎，圆球茎的生长，增殖分化，茎段的生根、壮苗四个组织培养阶段，这四个阶段所用的培养基依次为：无激素的MS培养基、无激素的MS基本培养基+土豆泥15～20g/l培养基、无激素的MS基本培养基+香蕉泥15～20g/l+土豆泥15～20g/l培养基和无激素的1/2MS基本培养基+香蕉泥15～20g/l+土豆泥15～20g/l培养基。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛无激素组织培养的方法，其特征在于所述四个阶段采用的培养条件：培养温度23～27℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d。
3.根据权利要求1所述的铁皮石斛无激素组织培养的方法，其特征在于该组织培养方法具体包括以下步骤：
a)将成熟铁皮石斛蒴果或铁皮石斛种子经过消毒处理，播入无激素的MS基本培养基中培养25～30天种胚膨大、萌发形成绿色的圆球茎；培养条件：培养温度23～27℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d；
b)将圆球茎转入无激素的MS培养基+土豆泥15～20g/l培养基中，培养25～30天，圆球茎重叠堆积在无激素培养基中，并有叶原基和分化苗出现；培养条件：培养温度23～27℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d；
c)将圆球茎分化苗转入无激素的MS基本培养基+香蕉泥15～20g/l+土豆泥15～20g/l培养基中，诱导20～30天后有叶原基和高度达到1～2cm小苗出现，继代培养30天成为中苗；培养条件：培养温度23～27℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d；
d)将中苗转入1/2MS基本培养基+香蕉泥15～20g/l+土豆泥15～20g/l的无激素培养基中，25～30天培育出5cm高以上的大苗并练苗移栽，练苗时保证75％～80％的含水量；培养条件：培养温度23～27℃，光照度1500～2000lx，光照时间12h/d；
以上四种培养基pH 5.6～5.8，均含30g/l蔗糖，6g/l琼脂。
4.根据权利要求1所述的铁皮石斛无激素组织培养的方法，其特征在于所述的无激素的MS基本培养基以及无激素的1/2MS基本培养基用水均为普通自来水。
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