[发明专利]岩黄连生物碱提取物及制备方法、脱氢卡维丁的提取方法无效
申请号: | 201210104207.4 | 申请日: | 2012-04-11 |
公开(公告)号: | CN102600247A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 胡玮 | 申请(专利权)人: | 宁波德沃生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K36/66 | 分类号: | A61K36/66;C07D455/03;A61P1/16;A61P31/20;A61P35/00 |
代理公司: | 余姚德盛专利代理事务所(普通合伙) 33239 | 代理人: | 戚秋鹏 |
地址: | 315000 浙江省宁波*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄连 生物碱 提取物 制备 方法 脱氢 卡维丁 提取 | ||
1.岩黄连生物碱提取物的制备方法,其特征在于,包括:
步骤1),将岩黄连粉碎成粗粉,投入萃取容器中,加入20倍重量的缓冲液后升温,加入复合酶得到预处理混合物,所述缓冲液的pH为2.5~6.0,所述复合酶的用量为2~5%,使所述预处理混合物在温度35~65℃、保温1~16小时,然后用稀盐酸将所述预处理混合物pH值调节至2~3,在温度35~65℃、保温1~10小时,接着4000r/min离心,收集上清液作为提取液;所述复合酶为包括纤维素酶和果胶酶的组合物;
步骤2),使所述步骤1)得到的提取液通过大孔吸附树脂,用浓度为20%~80%的乙醇溶液作为洗脱液进行解析,收集解吸后的溶液,干燥后得到粗总生物碱。
2.根据权利要求1所述的岩黄连生物碱提取物的制备方法,其特征在于,所述缓冲液选自磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中的一种或其组合。
3.根据权利要求2所述的岩黄连生物碱提取物的制备方法,其特征在于,所述大孔吸附树脂的型号选自HZ-806、AB-8、DA-201、HPD-400、NKA-9、S-8、HPD-500中的任一种。
4.根据权利要求3所述的岩黄连生物碱提取物的制备方法,其特征在于,还包括步骤3),将所述步骤2)得到的粗总生物碱用缓冲液溶解,在Sephadex LH-20分离柱上进行精制,得到精制后的总生物碱;所述缓冲液选自磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中的一种或其组合。
5.岩黄连生物碱提取物,其特征在于,采用上述权利要求1-4任一项方法制备得到。
6.根据权利要求5所述的岩黄连生物碱提取物,其特征在于,所述岩黄连生物碱提取物中的总生物碱含量为95%以上。
7.脱氢卡维丁的提取方法,其特征在于,将上述权利要求4所制备得到的总生物碱经高速逆流色谱进行分离,得到脱氢卡维丁单体,纯度达99%以上;所述高速逆流色谱的溶剂系统选自正己烷-甲醇-水、正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水、正己烷-乙腈-水、正丁醇-甲醇-水、正丁醇-乙酸-水、乙酸乙酯-甲醇-水、乙酸乙酯-正丁醇-水中的任一种。
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