[发明专利]微生物中酶活性的诱导和稳定

权利要求书

1.一种用于稳定腈水合酶的方法，所述方法包括以基质固定所述腈水合酶或能产生所述腈水合酶的微生物，从而使得在25℃的温度至少30天的时间以后，活性保持在由所述腈水合酶或所述能产生所述腈水合酶的微生物所表现出来的初始活性的至少约50％的水平。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述基质选自由藻酸盐和含有酰胺基的聚合物组成的组。

3.如权利要求2所述的方法，其中，所述含有酰胺基的聚合物包括聚丙烯酰胺。

4.如权利要求1所述的方法，其中，所述固定包括将来自所述微生物的细胞与戊二醛交联。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述微生物包括选自由红球菌属(genus Rhodococcus)、短杆菌属(genus Brevibacterium)、假单胞菌属(genus Pseudomonas)、假诺卡氏菌属(genus Pseudonocardia)、诺卡氏菌属(genus Nocardia)及其组合的细菌。

6.一种在产生腈水合酶的微生物内诱导酶活性的方法，所述方法包括在含有尿素和至少约50ppm的一种或多种含有酰胺基的氨基酸的培养基中培养所述产生腈水合酶的微生物，其中，所述产生腈水合酶的微生物包括假单胞菌属(genus Pseudomonas)的细菌，所述酶活性选自由腈水合酶活性、酰胺酶活性、天冬酰胺酶I活性及其组合组成的组，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬酰胺衍生物、谷氨酰胺衍生物及其组合组成的组。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述培养基进一步含有钴。

8.如权利要求6所述的方法，其中，所述培养基不含有任何含腈化合物。

9.如权利要求6所述的方法，其中，所述培养基进一步含有麦芽糖或麦芽糖糊精。

10.如权利要求6所述的方法，其中，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸以约200ppm～约2000ppm的浓度存在。

11.如权利要求6所述的方法，其中所述一种或多种微生物至少被部分固定。

12.一种在产生腈水合酶的微生物内诱导酶活性的方法，所述方法包括在含有至少约50ppm的一种或多种含有酰胺基的氨基酸的培养基中培养所述产生腈水合酶的微生物，所述酶活性选自由腈水合酶活性、酰胺酶活性、天冬酰胺酶I活性及其组合组成的组，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬酰胺衍生物、谷氨酰胺衍生物及其组合组成的组，其中，所述培养基不含有任何含腈化合物。

13.一种组合物，所述组合物包含：

(a)含有尿素和至少约50ppm的一种或多种含有酰胺基的氨基酸的营养培养基，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬酰胺衍生物、谷氨酰胺衍生物及其组合组成的组；

(b)能产生酶的一种或多种微生物，其中，所述一种或多种微生物包括假单胞菌属(genus Pseudomonas)的细菌；和

(c)一种或多种选自由腈水合酶、酰胺酶、天冬酰胺酶I及其组合组成的组的酶。

14.如权利要求13所述的组合物，其中，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸以约200ppm～约2000ppm的浓度存在。

15.如权利要求13所述的组合物，其中，所述一种或多种微生物至少被部分固定。

16.如权利要求13所述的组合物，其中，所述培养基进一步含有钴。

17.如权利要求13所述的组合物，其中，所述培养基不含有任何含腈化合物。

18.如权利要求13所述的组合物，其中，所述培养基进一步含有麦芽糖或麦芽糖糊精。

19.一种组合物，所述组合物包含：

(a)含有至少约50ppm的一种或多种含有酰胺基的氨基酸的营养培养基，所述一种或多种含有酰胺基的氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬酰胺衍生物、谷氨酰胺衍生物及其组合组成的组；

(b)能产生酶的一种或多种微生物，其中，所述一种或多种微生物包括假单胞菌属(genus Pseudomonas)的细菌，并且所述一种或多种微生物至少被部分固定；和

(c)一种或多种选自由腈水合酶、酰胺酶、天冬酰胺酶I及其组合组成的组的酶。