[发明专利]辣椒CaCOI1.2基因及其重组表达载体和应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及一种基因，还涉及该基因的重组表达载体和转化体，以及该基因的应用和具体应用方法。

背景技术

辣椒为茄科的一种重要农作物，在世界范围内广泛栽培。辣椒也是一种重要的调味品，通常和其它调味物共同运用在泡菜、烤肉等食物中。辣椒营养价值高，富含维生素A、B、C、D、E以及多种矿物质元素如钼、锰、钾等。从辣椒中提取的辣椒碱还具有药用价值，对腰椎痛、神经痛、风湿痛以及过敏性鼻炎等都有一定治疗作用。

虽然传统的植物育种在改良农作物（如质量性状）的过程中做出了巨大的贡献，但常规育种在筛选优良品种时难度大、耗时长，已经不能满足辣椒生产的需要。近年来，随着基因工程的迅速发展和转基因技术的日益完善，基因工程育种已成为育种领域的一个重要分支，在定向改良辣椒特性方面也显示出极大的潜力。但目前，利用转基因技术增加辣椒的抗病虫、抗除草剂和抗盐碱性能的报道相对较多，而有关辣椒增产的报道很少。此外，由于辣椒较其它茄科植物而言再生率偏低且不稳定，转化效率低，目前对大多数辣椒品种和不同的外植体还没有一个普遍适合的转化模式，也相应增加了利用转基因技术定向改良辣椒性状的难度。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种与辣椒花器官发育相关的基因，目的之二在于提供含有该基因的重组表达载体，目的之三在于提供含有该重组表达载体的微生物转化体，目的之四在于提供该基因在大果实辣椒植株育种中的应用，目的之五在于提供利用该基因获得大果实辣椒植株的方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1．辣椒CaCOI1.2基因，开放读码框序列由SEQ ID No.1中第186位至第1997位核苷酸组成。

进一步，所述辣椒CaCOI1.2基因的mRNA全长序列由SEQ ID No.1中第1位至第2041位核苷酸组成。

2．含有所述辣椒CaCOI1.2基因的重组表达载体。

进一步，所述重组表达载体是将辣椒CaCOI1.2基因的开放读码框序列插入载体pBI121的多克隆位点中而获得的超表达双元载体pBI121-CaCOI1.2。

3．含有所述重组表达载体的微生物转化体。

进一步，所述微生物为农杆菌。

4．所述辣椒CaCOI1.2基因在大果实辣椒植株育种中的应用。

5．利用所述辣椒CaCOI1.2基因获得大果实辣椒植株的方法，包括如下步骤：

a．辣椒外植体的制备：将辣椒种子用体积分数为75%的乙醇溶液消毒，无菌水冲洗，再用饱和磷酸钠溶液浸泡，无菌水冲洗，最后用体积分数为1%的次氯酸钠灭菌，无菌水冲洗，蒸馏水浸泡，播种于1/2 MS培养基上，在温度为20±2℃、光周期为16 h/d和光照强度为1000-2000 lx的条件下培养；取培养12天的辣椒幼苗，剪掉子叶的两端部分，同时将下胚轴剪成长0.8~1.2 cm的小段，选取子叶和下胚轴小段接入预培养培养基上，在20±2℃、黑暗条件下预培养1天，作为外植体；所述1/2 MS培养基含有质量分数为3%的蔗糖、质量分数为0.6-0.8%的琼脂，pH为5.8；所述预培养培养基为MS培养基，含有质量分数为3%的蔗糖、质量分数为0.8%的琼脂、1 mg/L 的玉米素和0.2 mg/L的吲哚乙酸，pH为5.8；