[发明专利]补气养阴中药复方制剂的质量检测方法

权利要求书

1.一种补气养阴中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于包括对内容物的鉴别和人参皂苷Rg1含量的检测：

(1)补气养阴中药复方制剂处方如下：

人参65～75g；麦冬130～145g；五味子85～100g；党参85～100g；黄芪30～45g；

所述的补气养阴中药复方制剂为口服液；

(2)薄层色谱法鉴别如下：

①人参的鉴别：

供试品溶液的制备：取口服液样品20ml，置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并提取液蒸干，残渣加硫酸的45％乙醇溶液15ml，硫酸与乙醇溶液两者体积比为7∶100，加热回流1～1.5小时，挥去乙醇，加三氯甲烷提取2次，每次10ml，分取三氯甲烷层，加适量无水硫酸钠脱水，过滤，滤液加于已处理好的中性氧化铝柱上用甲醇10ml洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，使成0.5ml，作为供试品溶液；中性氧化铝柱的参数为：内径1.5cm，100～120目，4g；

对照品溶液的制备：取人参二醇与人参三醇对照品，加无水乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；

薄层板：自制的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板，规格为10×20cm，涂布厚度为0.3mm；

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液5～10μl、对照品溶液5～10μl；

展开剂：环己烷-丙酮，两者体积比为3∶2；

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为12～14cm；

显色与检视：10％硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，紫外灯365nm下检视；

结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

②黄芪的鉴别：

供试品溶液的制备：取口服液样品20ml，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，弃去乙酸乙酯液，下层液用水饱和的正丁醇振摇提取5次，第一次30ml，其余每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，分别为100ml、80ml，分取正丁醇溶液蒸干，残渣加10％乙醇5ml溶解，通过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，分别用水50ml、40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇1ml溶解，作为供试品溶液，大孔吸附树脂柱内径1.5cm，高12～18cm；

对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，用甲醇制成每1ml含1mg的溶液；

薄层板：自制的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板，规格为10×20cm，涂布厚度为0.3mm；

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液10～15μl、对照品溶液4μl；

展开剂：氨蒸汽饱和的正丁醇-乙酸乙酯-水上层液与甲醇的混合溶液，两者体积比10∶1，正丁醇∶乙酸乙酯∶水三者的体积比4∶1∶5；

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为10～12cm，取出，晾干；再放入展开剂中展开，展距10～12cm；

显色与检视：10％硫酸乙醇溶液为显色剂，加热至斑点显色清晰；

结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；

③五味子的鉴别：

供试品溶液的制备：取口服液样品20ml，加三氯甲烷20ml，回流提取30分钟，分取三氯甲烷层，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：取五味子对照药材0.5g，同法制成对照品溶液；

阴性溶液的制备：将处方中的五味子除去，其他四味按与口服液相同的制备方法进行制备得到阴性对照样品；然后照供试品溶液的制备方法同法制备；

薄层板：自制的以0.5％羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板，规格为10×20cm，涂布厚度为0.3mm；

点样：专用定量毛细管接触式圆点状点样，点样量为供试品溶液10μl、对照品溶液5μl；

展开剂：以石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，三者的体积比为5∶5∶1，制备混合液时，石油醚温度为30～60℃；

展开方式：双槽展开缸，上行展开，展距为10～12cm，取出，晾干；

显色与检视：置紫外光灯254nm下检视；

结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；

(3)人参皂苷含量测定：

①仪器：

Scienhome KromasilC₁₈，5μ色谱柱(250×4.6mm)，UVD170紫外检测器；

②色谱条件的选择：

检测波长：203nm；

流动相：流速1.5ml/min；乙腈-0.05％磷酸两者体积比20∶80；

③供试品制备：

精密吸取样品15ml，水饱和正丁醇振摇提取4次，每次加入20ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用水洗涤3次，每次20ml，分取正丁醇液，回收至干，残渣用流动相溶解并定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，即得；

④对照品制备：精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，加流动相制成每1ml含200μg的对照品溶液；

⑤测试：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.根据权利要求1所述的补气养阴中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于其制备方法包括如下步骤：

(1)人参用80～90％乙醇回流提取3～5次，每次3～4小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成稠膏；

(2)麦冬、党参、黄芪加水煎煮3次，第一次2.5～3小时，第二次2～2.5小时，第三次1～1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，加乙醇使含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩成稠膏；

(3)将步骤(1)和步骤(2)上述稠膏合并，加水与活性炭，煮沸，冷藏12小时以上，滤过，滤液备用；活性炭占稠膏总质量的0.3％；

(4)五味子加水煎煮2～3次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，加乙醇使含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇后加水及活性炭，煮沸15～25分钟，滤过，滤液调pH值至4.5～5.0，冷藏12小时以上，滤过，滤液备用；活性炭占上清液回收乙醇后的溶液总质量的0.3％；

(5)将步骤(3)和步骤(4)滤液合并，加水及蔗糖150～190g，煮沸25～35分钟，滤过，放冷后加防腐剂和矫味剂，搅匀，调pH值至4.0～6.5，加水至1000ml，搅匀，灌装，灭菌，即得；防腐剂占滤液总质量的2.5％-3.5％，矫味剂占滤液总质量的0.8％～1.2％。