[发明专利]聚精胺阳离子及其构建方法和纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.一种聚精胺阳离子，其特征在于，其结构式为：

，

其中， n 为10～1000。

2.一种如权利要求1所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将羧基活化的咪唑-4，5-二甲酸的N，N-二甲基甲酰胺溶液在-10℃～10℃条件下缓慢滴加到精胺的N，N-二甲基甲酰胺溶液中，同时，加入催化剂；

（2）滴加完毕后，在10～30℃条件下搅拌进行聚合反应24～48小时，将反应溶液分离，纯化，即得聚精胺阳离子。

3.如权利要求2所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，将所述羧基活化的咪唑-4，5-二甲酸的N，N-二甲基甲酰胺溶液在0℃条件下缓慢滴加到精胺的N，N-二甲基甲酰胺溶液中。

4.如权利要求2所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，所述催化剂选自三氟乙酸或吡啶。

5.如权利要求2所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，所述步骤（2）中的分离，纯化步骤进一步包括：将所述反应溶液置于透析袋中透析，抽滤，预冻，冻干除去水分。

6.如权利要求5所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，所述透析袋的截留分子量为7000，透析的时间为12～48小时。

7.如权利要求2所述的聚精胺阳离子的构建方法，其特征在于，所述聚精胺阳离子在pH 7.4的磷酸盐缓冲液中重均分子量的降解半衰期为48～60小时，所述聚精胺阳离子在pH 5.8的磷酸盐缓冲液中重均分子量的降解半衰期为4～12小时。

8.一种包括权利要求1所述的聚精胺阳离子的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将聚精胺阳离子溶解于超纯水或无RNase酶水配制成浓度为1～3 mg/ml的聚精胺阳离子溶液，将核酸药物溶解于超纯水或无RNase酶水配制成浓度为0.5～1 mg/ml的核酸药物溶液；

（2）将所述聚精胺阳离子溶液快速加入核酸药物溶液中，均匀混合；

（3）将混合溶液于室温下孵育20～30分钟，即得包括聚精胺阳离子的纳米颗粒。

9.如权利要求8所述的包括聚精胺阳离子的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述核酸药物为DNA或RNA。

10.如权利要求8所述的包括聚精胺阳离子的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述核酸药物为DNA疫苗、siRNA或microRNA。

11.如权利要求8所述的包括聚精胺阳离子的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述纳米颗粒的粒径为100～300 纳米。

12.如权利要求8所述的包括聚精胺阳离子的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述纳米颗粒中核酸药物的含量为1～3 %。