[发明专利]从吐根中提取分离盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的一种制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从吐根中提取精制盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的方法。

背景技术

吐根是多年生常绿矮小灌木，为茜草科，头九节属。根呈扭曲圆柱形，暗棕色，茎青绿，枝质软，花白色。吐根主要产于巴西潮湿森林地带，商品名为巴西吐根。吐根在印度东部的Bengal、缅甸、马来亚联邦、新加坡、印度尼西亚等地种植成功，我国广东、云南、台湾也有引种栽培。

吐根中主要含有醚溶性总生物碱，其中又以盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱为主。吐根为南美印第安人的药品，于1672年传入欧洲，被认为是痢疾的治疗药物，对阿米巴痢疾治疗效果较好。现在吐根的应用更为广泛，作为催吐药疗效确切，即使中等剂量也能刺激呕吐直至胃内容物被清除；小剂量使用是强祛痰剂，常用于许多止咳药中，用于支气管炎、百日咳的治疗。吐根具有一定的毒性，其毒性成分和治疗成分都是以盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱为主的总生物碱，该发明对今后制剂中盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的精确控制从而提高药品安全性具有显著意义。

由于吐根属于进口药品，国内对其相关研究甚少，也缺乏相应的提取精制方法的文献。有报道称采用乙醇对吐根进行超声提取，可以有效提取醚溶性生物总碱【许立颖、宋伟峰，吐根醚溶性生物碱提取工艺研究，制剂与技术，2011年4月8卷第11期】但是醚溶性生物碱包括了许多的成分，且并未涉及到盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的提取精制方法。

发明内容

本发明提供一种从吐根中提取精制盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的方法，该方法包括如下步骤：

a、超声提取：取吐根药材，粉碎，加入酸性乙醇，超声提取，得提取液A；

b、浓缩：提取液A离心，取上清液，挥尽溶剂，调节PH值至碱性，得浓缩液B；

c、萃取：浓缩液B以乙醚萃取，收集乙醚层，挥干溶剂，得残渣C；

d、分离纯化：将残渣C溶解，注入制备液相，采用制备色谱进行分离纯化，采用ODS柱分离，流动相为乙腈：三乙胺；根据检测图谱盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱对应的谱带，分别馏分收集溶液D和溶液E；

e、冷冻干燥：将得到的溶液D和溶液E分别浓缩至有机溶剂除去后，调节PH值至酸性，进行冷冻干燥，得到盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱。

该方法中所指的酸性乙醇，是指将所需浓度的乙醇，加入适量盐酸，配置成所需酸度的乙醇。

本发明从吐根中提取精制盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的方法优选包括如下步骤：

a、超声提取：取吐根药材，粉碎，加入10-40倍量1％-3％的酸性乙醇，乙醇浓度为50-90％，超声提取0.5-2小时，得提取液A；

b、浓缩：提取液A离心，取上清液，40-60℃减压挥尽乙醇，调节PH值到10-12，得浓缩液B；

c、萃取：浓缩液B以同体积乙醚萃取1-4次，收集乙醚层，挥干溶剂，得残渣C；

d、分离纯化：将残渣C用乙腈溶解，定容至相当于生药量1g每ml，采用制备色谱进行分离纯化，色谱条件：色谱柱：ODS色谱柱；流动相为乙腈：0.05％三乙胺，室温体积比为40-45∶60-55；流速为1.0ml/min-5.0ml/min；根据检测图谱盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱对应的谱带，分别馏分收集溶液D和溶液E；

e、冷冻干燥：将得到的溶液D和溶液E分别减压浓缩至有机溶剂除去后，调整pH值到3-5，进行冷冻干燥，得到盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱。

本发明从吐根中提取精制盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的方法更优选包括如下步骤：

a、超声提取：取吐根药材，粉碎，加入20倍量1％的酸性乙醇，乙醇浓度为70％，超声提取1小时，得提取液A；

b、浓缩：提取液A离心，取上清液，40℃减压挥尽乙醇，调节PH值到10，得浓缩液B；

c、萃取：浓缩液B以同样体积的乙醚萃取4次，收集乙醚层，挥干溶剂，得残渣C；

d、分离纯化：将残渣C用乙腈溶解，定容至相当于生药量1g每ml，采用制备色谱进行分离纯化，色谱条件：色谱柱：C₁₈色谱柱；检测波长：283nm；流动相为乙腈：0.05％三乙胺，室温体积比为45∶55；流速为5.0ml/min；根据检测图谱盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱对应的谱带，分别馏分收集溶液D和溶液E；

e、冷冻干燥：将得到的溶液D和溶液E分别减压浓缩至有机溶剂除去后，调整pH值到4，进行冷冻干燥，得到盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱。

本发明从吐根中提取精制盐酸吐根碱和盐酸吐根酚碱的方法更优选还包括如下步骤：