[发明专利]胶乳增强免疫比浊法测定人甲胎蛋白含量的试剂盒

权利要求书

1.一种胶乳增强免疫比浊法测定人甲胎蛋白含量的试剂盒，该试剂盒包括：甲胎蛋白R1试剂、甲胎蛋白R2试剂和甲胎蛋白校准品，其中：

所述甲胎蛋白R1试剂包含电解质、促凝剂、稳定剂、表面活性剂、防腐剂及缓冲液；

所述甲胎蛋白R2试剂包含抗人甲胎蛋白多克隆抗体包被胶乳颗粒、电解质、稳定剂、表面活性剂、防腐剂及缓冲液；

所述甲胎蛋白校准品包含防腐剂、电解质、稳定剂、甲胎蛋白抗原及缓冲液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中抗人甲胎蛋白多克隆抗体可选自鸡、鸭、鹅等禽类的IgY抗体，优选鸡IgY抗体。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中抗人甲胎蛋白多克隆抗体通过使用人甲胎蛋白抗原亲和纯化而获得。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中胶乳颗粒为直径范围100～300nm、浓度为0.5～5mg/mL的聚苯乙烯胶乳颗粒，直径优选150～250nm，更优选200nm。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其中胶乳颗粒表面由功能团修饰，该功能团选自羧基、氨基、羟基、酰肼或氯甲基，优选羧基。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其中抗体包被胶乳颗粒是通过化学交联剂在交联缓冲液中进行的，所用的化学交联剂选自碳化亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、酰肼、异氰酸酯或其组合；交联缓冲液选自不含氨基的缓冲液，MES、MOPSO、MOPS、HEPES、磷酸盐缓冲液，pH在6.0～8.0之间。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，该试剂盒包括：甲胎蛋白R1试剂、甲胎蛋白R2试剂和甲胎蛋白校准品，其中：

所述甲胎蛋白R1试剂包含占其质量百分比为：0.1％～5.0％电解质、2％～6％促凝剂、0.1％～1％稳定剂、0.1％～1.0％表面活性剂、0.05％～0.1％防腐剂及pH7～9、浓度范围为10～100mmol/L的缓冲液；

所述甲胎蛋白R2试剂包含抗人甲胎蛋白的多克隆抗体包被胶乳颗粒，还包含占其质量百分比为：0.1％～5.0％电解质、0.5％～5％稳定剂、0.1％～1.0％表面活性剂、0.05％～0.1％防腐剂及pH7～9、浓度范围为10～100mmol/L的缓冲液；

所述甲胎蛋白校准品包含占其质量百分比为：0.01％～1.0％防腐剂、0.1％～5.0％电解质、0.05％～5.0％稳定剂、0～250ng/ml甲胎蛋白抗原及溶解在预处理的人血清基质中、pH 6.5～8.0、浓度为10～100mmol/L的缓冲液。

8.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述电解质选自无机盐类，氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸镁或其组合，优选氯化钠。

9.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述稳定剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、鱼皮明胶蛋白、葡萄糖、果糖、甘露糖、壳聚糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二钠或其组合。

10.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述促凝剂选自PEG-4000、PEG-6000、PEG-8000、硫酸葡聚糖钠，优选PEG-6000。

11.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述表面活性剂选自吐温系列、脂肪醇聚乙二醇醚类、聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯月桂醚系列或其组合，优选吐温20。

12.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述防腐剂选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯、ProClin系列、三嗪类有机化合物等，优选叠氮钠。

13.根据权利要求1或7所述的试剂盒，其中所述甲胎蛋白校准品中的甲胎蛋白选自自人体体液中提取、纯化而得的天然甲胎蛋白，或自肝癌细胞株培养、纯化而得的甲胎蛋白，纯度≥95％。