[发明专利]耐有机溶剂蛋白酶的突变体有效
申请号: | 201210113983.0 | 申请日: | 2012-04-17 |
公开(公告)号: | CN102660521A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 何冰芳;庄宇;朱富成;吴斌 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52;C12N15/57;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12P21/06;C12R1/385 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 樊文红 |
地址: | 211816 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 有机溶剂 蛋白酶 突变体 | ||
1. 一种蛋白酶突变体,是通过用另一种氨基酸残基取代在由SEQ ID No:1表示的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相应位置上的氨基酸残基而获得的蛋白酶突变体,且所述的氨基酸残基位置为SEQ ID No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有机溶剂中稳定性提高。
2. 一种蛋白酶突变体,是通过用另一种氨基酸残基取代在由SEQ ID No:1表示的氨基酸序列表现出至少90%同源性的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相应位置上的氨基酸残基而获得的蛋白酶突变体,且所述的氨基酸残基位置为SEQ ID No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有机溶剂中稳定性提高。
3. 一种蛋白酶突变体,是通过用另一种氨基酸残基取代在由SEQ ID No:1表示的氨基酸序列表现出至少99%同源性的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相应位置上的氨基酸残基而获得的蛋白酶突变体,且所述的氨基酸残基位置为SEQ ID No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有机溶剂中稳定性提高。
4. 根据权利要求1至3之一所述的蛋白酶突变体,其特征在于所述的另一种氨基酸残基选自下述的氨基酸:第46位:酪氨酸;第224位:苯丙氨酸或酪氨酸。
5. 编码权利要求1至3之一所述的蛋白酶突变体的基因。
6. 包含权利要求5所述基因的重组载体。
7. 包含权利要求6所述重组载体的转化体。
8. 利用权利要求1至3之一所述的蛋白酶突变体在非水体系中催化小肽合成反应的应用。
9. 根据权利要求8所述的应用,其特征在于:以Cbz-Gly-OH和L-Phe-NH2为底物,本发明所述的蛋白酶突变体溶解在pH8.0的Tris-HCl中,与等体积的有机溶剂混合,在30℃保温反应。
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