[发明专利]甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，包括甲状腺素系列标准品，T4-IgG包被的磁微粒，碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗体，荧光发光底物，样本稀释液，浓缩洗涤液，还包括一个反应测试杯。

2.根据权利要求1所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，其特征在于：所述反应测试杯为不透明聚苯乙烯、聚乙烯或聚丙烯中的一种材料制成。

3.根据权利要求1所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，其特征在于：所述甲状腺素抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。

4.根据权利要求1所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，其特征在于：所述的荧光发光底物，包括冻干粉和底物溶解液；其中，底物冻干粉为磷酸-4-甲基伞形酮；底物溶解液为2-氨基-2甲基-1丙酮。

5.根据权利要求1所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，其特征在于：所述浓缩洗涤液为，浓度0.01-0.05M、pH值为7.0-7.6的磷酸盐缓冲液，且缓冲液中含有0.01-0.05％的吐温20和终浓度为8-14g/L的氯化钠。

6.根据权利要求1所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒，其特征在于：所述样本稀释液为磷酸盐缓冲液。

7.一种甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒的制备方法，采用如下工艺步骤：

A)甲状腺素系列标准品的制备：用去激素人血清稀释甲状腺素纯品，其浓度为0-360ng/ml；

B)T4-IgG包被磁微粒的制备：将粒径为0.5-1mm的磁微粒静置于含1-1.5ug/ml T4-IgG，浓度为0.01M的碳酸盐缓冲液中，室温混匀10-30min后37℃过夜，取出，用稀释好的浓缩洗涤液清洗1-3次，4℃封闭液过夜，洗1-3次并抽真空干燥，平均分配到反应测试杯中；

C)碱性磷酸酶标记的甲状腺素抗体标记物的制备：T4单克隆抗体采用过碘酸钠法与碱性磷酸酶交联，用酶标记物稀释液进行稀释，稀释比例为1∶3000，制成酶标工作液；

D)荧光发光底物的制备：去离子水中含0.01-0.05mM磷酸-4-甲基伞形酮，制成冻干粉；底物溶解液为，浓度0.1-0.5M、pH值9.0-11.0的2-氨基-2-甲基-1丙酮；

E)样本稀释液的制备：浓度为0.01-0.05M的磷酸盐缓冲液，pH值为7.0-7.6。

F)浓缩洗涤液的制备：向步骤E中的磷酸盐缓冲液中加入体积百分比为0.01-0.05％吐温20和终浓度为8-14g/L的氯化钠；

G)分装步骤：取步骤C中制得的酶标工作液100ul-200ul平均分配到步骤B中含有磁微粒的反应杯中，并冻干封口；

H)将上述试剂组装成试剂盒。

8.根据权利要求7所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，磁微粒为直径0.05-1mm粒径、四氧化三铁内核、表面包裹带有氨基活性基团的聚合物。

9.根据权利要求7所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，封闭液是含有质量百分比浓度为0.05％-0.5％明胶和0.05％-0.2％叠氮钠的pH为7.4的浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液。

10.根据权利要求7所述的甲状腺素磁微粒荧光发光免疫分析试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤C中，酶标记物稀释液为，含有0.4mg/ml ANS和0.05％BSA的Tris-CL缓冲液，缓冲液的pH值为8.0。