[发明专利]一种龙脑樟细胞悬浮培养液及悬浮培养方法

权利要求书

1.一种用于龙脑樟细胞悬浮培养的培养液，包括：

MS基本培养基

2，4-D  1.5-2.5mg/L；

6-BA  0.4-0.8mg/L；

LH 100-1000mg/L；

椰汁0-250mg/L；

CH 500-1500mg/L；和

蔗糖2-5％。

2.如权利要求1所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养液，其特征在于：MS基本培养基+2mg/L2，4-D+0.6mg/L 6-BA++100mg/L LH+150mg/L椰汁+500mg/L CH+3％蔗糖。

3.一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，包括如下步骤：

(1)培养获取龙脑樟愈伤组织；

(2)提供权利要求1或2的龙脑樟细胞悬浮培养液；

(3)愈伤组织在悬浮培养液中进行悬浮培养；

(4)收获细胞，提取右旋龙脑。

4.如权利要求3所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：步骤(3)的培养包括初代培养和继代培养，培养的光照强度为0-3000Lux；光照采用白光、红光或蓝光；光照方式采用连续光照方式。

5.如权利要求3所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：步骤(3)的接种量为40-60g/L。

6.如权利要求3所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：培养18-24天后收获细胞，提取右旋龙脑。

7.如权利要求3所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：步骤(4)收获细胞的前3天在16℃条件下培养3天。

8.如权利要求3所述的一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：步骤(3)摇床转速为90-130r/min。

9.一种龙脑樟细胞悬浮培养方法，其特征在于：细胞悬浮培养基配方为：MS基本培养基+2mg/L 2，4-D+0.6mg/L 6-BA+500mg/L LH+500mg/L CH+150ml/L椰汁+3％蔗糖，pH值为5.8；外界调控条件为：光照强度为2000Lux的白光连续照射，培养5天后置于16℃低温环境下处理3天，采用250ml的三角瓶装液80ml，接种量为40g/L·FW，摇床转速为110r/min，采用透气膜封口，培养21天收获。