[发明专利]从牛肺中提取肝素钠的方法无效
申请号: | 201210134902.5 | 申请日: | 2012-05-03 |
公开(公告)号: | CN102633909A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 徐殿英;李作红;陈勇;司建奎 | 申请(专利权)人: | 白银富瑞康生物制品有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张真 |
地址: | 730900 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 牛肺中 提取 肝素钠 方法 | ||
1.一种从牛肺中提取肝素钠的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)制浆:将牛肺中大的气管和外部皮质脂肪剔除,将其绞碎,匀化成浆液,牛肺∶水=1∶2-3,将pH调至9;
(2)酶解:将上述浆液加热至39-41℃,按浆液质量的1.5-3.5%加入蛋白酶,进行酶解3-4小时,监测PH的变化,控制pH为7.5-8.5,过滤酶解液,然后按浆液质量的0.5-1.5%加入肝素钠专用复合酶,将温度升到49-51度,控制pH为7.5-8.5,保温酶解3-3.5小时,监测酶解液效价不再变化酶解结束;
(3)灭酶:将步骤(2)得到的酶解液加入蛋白沉淀剂及NaCL,蛋白沉淀剂加入量为浆液质量的4-4.5%,NaCL加入量为浆液质量的1-2%,升温70-80℃,保温0.5-1小时,按浆液质量的0.5-1%加入氯化钙沉淀剂,沉淀1-2小时,将温度降至50℃;
(4)提纯:先经过自动过滤分离器进行一级提纯、其次经过粗滤器进行二级提纯、再经过细滤器进行三级提纯,最后经过精滤器进行四级提纯,得分离液;
(5)冻干燥:将上述分离液进一步浓缩,再冻干燥得肝素钠。
2.如权利要求1所述的从牛肺中提取肝素钠的方法,其特征在于所述一级提纯是采用自动过滤分离器,将大于0.01毫米的机械杂质及颗粒蛋白除去,得到一级纯化分离液,并回收蛋白。
3.如权利要求1所述的从牛肺中提取肝素钠的方法,其特征在于所述二级提纯是将一级纯化分离液加入到粗滤器中,清除大于0.09微米的杂蛋白,得到二级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。
4.如权利要求1所述的从牛肺中提取肝素钠的方法,其特征在于所述三级提纯是将二级纯化分离液加入到细滤器进行分离,清除其中大于0.03微米的杂蛋白,得到三级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。
5.如权利要求1所述的从牛肺中提取肝素钠的方法,其特征在于所述四级提纯是将三级纯化分离液加入到精滤器进行分离,清除微小分子蛋白、氨基酸、无机盐等,得到四级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。
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