[发明专利]一种固定化L-天冬酰胺酶反应器

权利要求书

1.一种制备纳米金固定化L-天冬酰胺酶反应器的方法，包括下述步骤：

1）将纳米金溶液与L-天冬酰胺酶溶液混匀，室温搅拌0.5-5小时，然后置于2-8℃静置反应12-24小时，得到L-天冬酰胺酶-纳米金聚集体溶液；

2）制备内壁修饰巯基硅烷偶联剂的毛细管柱；

3）将所述L-天冬酰胺酶-纳米金聚集体溶液流经步骤2）处理后的毛细管并与其内壁充分接触，在2-8℃放置反应12-24小时，利用巯基与纳米金的反应使L-天冬酰胺酶-纳米金聚集体固定于毛细管柱内壁，得到纳米金固定化L-天冬酰胺酶反应器。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）中所述纳米金溶液中纳米金的平均粒径为13-22nm。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1）中所述纳米金溶液是采用柠檬酸三钠法制备得到的；所述L-天冬酰胺酶溶液的浓度为4.5-225.0U/mL。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：步骤2）中制备内壁修饰巯基硅烷偶联剂的毛细管柱的方法如下：

1）将毛细管内壁进行活化；

2）将巯基硅烷偶联剂与甲醇按照体积比1:4-1:1进行混合，将混合溶液流经活化后的毛细管并与其内壁充分接触，然后室温放置反应12-24小时，得到内壁修饰巯基硅烷偶联剂的毛细管柱。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述将毛细管内壁进行活化的方法如下：将毛细管先依次用氢氧化钠溶液、水进行清洗；再依次用盐酸溶液、水依次进行清洗；最后用有机溶剂冲洗，氮气吹干。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述氢氧化钠溶液的浓度为0.1-1.0M，氢氧化钠溶液清洗的时间为0.5-2小时；

所述盐酸溶液的浓度为0.1-1.0M，所述盐酸溶液的清洗时间为10-30分钟；

所述水的清洗时间为10-30分钟。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于：所述毛细管柱的长度为5-50cm。

8.权利要求1-7中任一项所述方法制备得到的纳米金固定化L-天冬酰胺酶反应器。

9.纳米金作为酶固定化材料在制备固定化L-天冬酰胺酶中的应用。