[发明专利]基于T7核酸外切酶抑制分析检测有机小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感方法

权利要求书

1.一种T7核酸外切酶抑制分析检测有机小分子与结合蛋白相互作用的荧光生物传感方法，包括如下步骤：

(1) 包含中间有机小分子修饰的寡核苷酸DNA单链与蛋白的相互作用及T7核酸外切酶抑制分析；

(2) 选择T7核酸外切酶抑制位点；

(3) 采用基于Taqman探针的实时荧光定量方法进行T7核酸外切酶抑制分析的定量检测。

2.根据权利要求1 所述的生物传感方法，其特征是，所述中间有机小分子修饰的寡核苷酸DNA单链与蛋白的相互作用的检测及T7核酸外切酶抑制分析方法为：

对于有机小分子与其结合蛋白的相互作用，检测步骤是：取所述有机小分子修饰寡核苷酸DNA单链置于微量管中；再于微量管中加入包含有机小分子结合蛋白的样品溶液；然后加入T7核酸外切酶和Taqman探针,得抑制反应的产物；

对于有机小分子的检测，采用竞争反应检测步骤：取所述有机小分子修饰的寡核苷酸DNA单链置于微量管中；再加入包含待测小分子的样品溶液，混合均匀后加入有机小分子结合蛋白或单克隆抗体溶液；再加入T7核酸外切酶和Taqman探针，得抑制反应的产物。

3. 根据权利要求1 所述的生物传感方法，其特征是，所述T7核酸外切酶抑制位点选择与Taqman探针5端互补的有机小分子修饰的寡核苷酸DNA单链下游1到3碱基中的任意一个。