[发明专利]单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测用引物组和试剂盒

权利要求书

1.单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测用引物，其特征在于：所述的引物为一套单增李斯特菌特征性引物组，一套引物组由两对引物组成，一对引物为外引物，一对为内引物，序列分别为：

外引物1：CAAGCACTGTAGTAGTCGA

外引物2：CGTAATAATACTGTTATCAACACC

内引物1：GTTTGCTTTTTTAATTGCGTCAACATTTTAGCTGGTGATACTCTTTGG

内引物2：ACAAGTAAATAATGAGGTTGCTGCTTTTTCGGACGTTTAACCAAGTTG。

2.单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括如权利要求1所述的引物组、反应液、Bst DNA聚合酶、样品预处理液和阳性对照液。

3.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：所述的引物组由体积比为1：1：4：4的20-30μM外引物1、外引物2、内引物1与内引物2组成。

4.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：所述的反应液是由体积比为5：2：1：2的10×Thermopol 反应缓冲液、 7.5～12.5mM dNTP, 100-200mM MgSO₄与25～37.5M 甜菜碱组成。

5.根据权利要求4所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：所述的10×Thermopol 反应缓冲液含有200 mM  pH8.8三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐、100 mM氯化钾、100 mM硫酸铵、20 mM硫酸镁和体积百分比浓度为1%曲拉通X-100。

6.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：Bst DNA聚合酶每微升含8～16个活性单位。

7.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：样品预处理液是由20mM  pH 8.0  Tris-HCl ，2mM EDTA，体积百分比浓度为1.2%曲拉通X-100组成。

8.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒还包括显色剂，显色剂为荧光染料。

9.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：阳性对照液为单增李斯特菌标准菌株基因组DNA。