[发明专利]一种荧光原位微量淋巴毒检测方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201210143662.5 | 申请日： | 2012-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN102636655A | 公开（公告）日： | 2012-08-15 |
| 发明（设计）人： | 李杨;何军;徐超 | 申请（专利权）人： | 苏州大学附属第一医院 |
| 主分类号： | G01N33/96 | 分类号： | G01N33/96 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 冯琼 |
| 地址： | 215006 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 原位 微量 淋巴 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种荧光原位微量淋巴毒检测方法，其特征在于，将受者血清和供者淋巴细胞混匀孵育，使受者血清中IgG抗体的Fab段与供者淋巴细胞表面抗原结合，洗板后加入由补体和抗人IgG轻链的二抗组成的混合液孵育，使所述二抗的Fab段与受者血清中IgG抗体结合，补体与二抗的Fc段结合，然后由补体介导细胞杀伤效应杀死靶细胞，接着进行荧光染色并利用计数法统计供者淋巴细胞的死亡率，所述补体和二抗的体积比为150-250∶1，所述供者淋巴细胞的存活率大于90%。
2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述供者淋巴细胞的含量为2×106个/L。
3.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述二抗为羊抗人IgGκ轻链的IgG。
4.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述受者血清和供者淋巴细胞的体积比为2∶1。
5.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述补体和二抗的体积比为200∶1。
6.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述供者淋巴细胞与混合液的体积比为1∶5。
7.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述荧光染色为AO/EB双荧光染色。
8.一种荧光原位微量淋巴毒检测试剂盒，其特征在于，包括补体和抗人IgG轻链的二抗。
9.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，所述二抗为羊抗人IgG κ轻链的IgG。
10.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括AO/EB双荧光染色液和PBS洗板液。
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