[发明专利]一种鱼类小清蛋白荧光标记抗体、制备方法及其用途无效
| 申请号： | 201210153421.9 | 申请日： | 2012-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN102680674A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 曹敏杰;沈建东;蔡秋凤;刘光明;苏文金 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533 |
| 代理公司： | 厦门市诚得知识产权代理事务所 35209 | 代理人： | 方惠春 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鱼类 蛋白 荧光 标记 抗体 制备 方法 及其 用途 | ||
1.一种鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体组合而成。
2.权利要求1的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体均分别进行了处理；其中藻红蛋白通过SPDP处理；鱼小清蛋白单克隆抗体通过2-IT处理；优选鱼小清蛋白单克隆抗体为抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体。
3.权利要求1的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，制备方法包括如下步骤：
藻红蛋白的处理：藻红蛋白与SPDP进行混合后，恒温摇床100 rpm/min，25℃反应45 min，过脱盐柱去除多余SPDP，用Millipore 10 kDa的超滤浓缩管离心；
鱼小清蛋白单克隆抗体的处理：鱼小清蛋白单克隆抗体与2-IT进行混合后，摇床100 rpm/min，25℃反应45 min，过脱盐柱去除多余的2-IT，用Millipore 10 kDa的超滤浓缩管离心；
藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体的混合反应：将处理后的藻红蛋白与处理后的鱼小清蛋白单克隆抗体在一定温度下避光反应；
收集：将反应后的样品上样于高效液相色谱，根据分子量收集标记部分。
4.权利要求2的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，藻红蛋白与SPDP的摩尔比为1:80。
5.权利要求2的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，鱼小清蛋白单克隆抗体与2-IT的摩尔比为1:100。
6.权利要求2的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，藻红蛋白和鱼小清蛋白单克隆抗体的处理中恒温摇床条件均为100 rpm/min，25℃避光反应45 min。
7.权利要求2的鱼类小清蛋白荧光标记抗体，其特征在于，藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体的混合反应中，反应条件为25℃避光反应16 h。
8.权利要求1－7项任一所述的鱼类小清蛋白荧光标记抗体的制备方法，其步骤为：
藻红蛋白的处理：藻红蛋白与SPDP进行混合后，恒温摇床反应，过脱盐柱去除多余SPDP，用Millipore 10 kDa的超滤浓缩管离心；
鱼小清蛋白单克隆抗体的处理：鱼小清蛋白单克隆抗体与2-IT进行混合后，摇床100 rpm/min，25℃反应45 min，过脱盐柱去除多余的2-IT，用Millipore 10 kDa的超滤浓缩管离心；
藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体的混合反应：将处理后的藻红蛋白与处理后的单克隆抗体在一定温度下避光反应；
收集：将反应后的样品上样于高效液相色谱，根据分子量收集标记部分。
9.权利要求8的制备方法，其特征在于，所述藻红蛋白与SPDP的摩尔比为1:80；
鱼小清蛋白单克隆抗体与2-IT的摩尔比为1:100；
藻红蛋白的处理中恒温摇床条件为100 rpm/min，25℃避光反应45 min；
鱼小清蛋白单克隆抗体的处理中摇床反应条件100 rpm/min，25℃反应 45 min；
藻红蛋白与鱼小清蛋白单克隆抗体的混合反应中，反应条件为25℃避光反应16 h；
鱼小清蛋白单克隆抗体优选为抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体。
10.权利要求1－7任一项所述的鱼类小清蛋白荧光标记抗体的用途，优选为检测鱼类小清蛋白的用途，更优选为检测鲢鱼小清蛋白的用途。
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