[发明专利]一种载TGF-β3的缓释组织工程膜无效
申请号: | 201210159222.9 | 申请日: | 2012-05-21 |
公开(公告)号: | CN102657850A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 熊雁;蒋科;王爱民;张正治;王子明;杜全印 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
主分类号: | A61K38/18 | 分类号: | A61K38/18;A61K47/38;A61P41/00;A61L31/04;A61L31/16 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所 50211 | 代理人: | 郭云 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 tgf 组织 工程 | ||
1.一种载TGF-β3的缓释组织工程膜,其特征在于:由致密层(1)和多孔层(2)两层组成,所述多孔层(2)厚度为200-300um,该多孔层(2)内载有壳聚糖微球;
a、所述致密层(1)的形成
壳聚糖溶于1%的醋酸水溶液,配制成2%的壳聚糖溶液,4℃离心5min,去除杂质,静置除气泡后待用;将1.0ml上述溶液浇入直径9cm培养皿中,室温放置24h自然晾干形成致密层(1);
b、多孔层(2)的形成
再将3ml的壳聚糖溶液倾入放置致密层的培养皿中,-20℃预冻1h后冷冻干燥形成多孔层(2)得到壳聚糖不对称膜;
c、壳聚糖微球(3)的制备
壳聚糖120mg溶于2%的醋酸水溶液4-6ml,配成2%的壳聚糖溶液,静置除气泡后待用;150ml烧杯中加入80mI液体石蜡,调整搅拌速度至1000rpm,滴加乳化剂Span-804ml;用无菌注射器将壳聚糖溶液逐滴加至液体石蜡中,搅拌乳化至颜色呈均一稳定乳白色;加入0.4ml的50%戊二醛溶液与壳聚糖交联固化,搅拌固化1小时,静置固化20分钟,淡黄色微球沉淀于杯底;倾去上层油相,大量石油醚反复清洗,倒去上层石油醚,得微球,石油醚室温挥发30分钟,得较干燥壳聚糖微球(3);
d、载TGF-β3的缓释组织工程膜制备:
将步骤(1)壳聚糖不对称膜裁成直径为1cm的圆片,准确称量TGF-β3,按壳聚糖微球0.5mg含TGF-β3l0mg悬于100ul的90%酒精,加入壳聚糖膜多孔层,使微球均匀吸附到壳聚糖膜的孔隙中得到载TGF-β3的壳聚糖缓释膜。
2.根据权利要求1所述载TGF-β3的缓释组织工程膜,其特征在于:所述用无菌注射器将壳聚糖溶液逐滴加至液体石蜡中,在37度水浴下1000rpm搅拌乳化至颜色呈均一稳定乳白色。
3.根据权利要求1或2所述载TGF-β3的缓释组织工程膜,其特征在于:所述加入0.4ml的50%戊二醛溶液与壳聚糖交联固化,在37度水浴下1000rpm搅拌固化1小时。
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