[发明专利]一种与四环素结合的蛋白TetR及其编码基因和应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下（a）或（b）或（c）：

（a）由序列表中序列1自N末端第2至207位氨基酸残基组成的蛋白质；

（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（c）将（a）或（b）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与四环素类抗生素结合的由（a）衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因为如下1）-4）中任一所述的DNA分子：

1）序列表中序列2自5’末端第4至624位核苷酸所示的DNA分子；

2）序列表中序列2所示的DNA分子；

3）在严格条件下与1）或2）所述的DNA分子杂交且编码所述蛋白的DNA分子；

4）与1）或2）所述的DNA分子具有90%以上的同源性且编码所述蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述基因的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或重组菌。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述重组表达载体为在载体pET28b的多克隆位点插入所述基因得到的重组质粒。

6.如权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为将权利要求5所述重组质粒导入大肠杆菌得到的重组菌。

7.如权利要求6所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为大肠埃希氏菌（Escherichia coli)LYP-BLR，其保藏号为CGMCC No.5759。

8.权利要求4或6或7所述重组菌在制备权利要求1所述蛋白质中的应用。

9.一种制备权利要求1所述蛋白质的方法，包括如下步骤：培养权利要求4或6或7所述重组菌，得到权利要求1所述蛋白质；所述培养过程中加入IPTG作为诱导剂。

10.如权利要求9所述方法，其特征在于：在培养体系的OD₆₀₀为0.6时，加入所述IPTG，使IPTG在所培养体系中的浓度为1mM。