[发明专利]一种与四环素结合的蛋白TetR及其编码基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种与四环素结合的蛋白TetR及其编码基因和应用。

背景技术

四环素类抗生素（tetracycline antibiotics)是由放线菌产生的一类广谱抗生素，包括金霉素（chlotetracycline)、土霉素（oxytetracycline）、四环素（tetracycline）及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素、二甲胺基四环素等，其结构均含并四苯基本骨架。

食品中残留的抗生素会破坏胃肠道菌群平衡，并可导致长期的腹泻、维生素缺乏及影响其它药物的疗效，从而影响人体健康。当前抗生素的残留问题已经引起人们的广泛关注，作为人们生活中的必需品，牛奶中的抗生素残留问题更是日益受到关注。要想确保牛奶质量安全，除了严格控制产业链中抗生素的使用外，建立牛奶中抗生素的快速检测方法则显得尤为重要。

鉴于抗生素的作用与危害并存，动物性食品中四环素类抗生素的残留问题受到关注，各国制定了动物源性食品中兽药最高残留标准和检测方法。我国2002年农业部发布的235公告中规定土霉素/金霉素/四环素在所有动物性食品的肌肉中的含量不得高于100μg/kg，在牛奶及羊奶中的含量也不能超过100μg/kg。

发明内容

本发明的目的是提供一种与四环素结合的蛋白TetR及其编码基因和应用。

本发明提供的蛋白质，来自大肠杆菌LYP-20菌株，可以与四环素特异结合，是如下如下（a）或（b）或（c）：

（a）由序列表中序列1自N末端第2至207位氨基酸残基组成的蛋白质；

（b）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（c）将（a）或（b）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与四环素类抗生素结合的由（a）衍生的蛋白质。

为了使（a）或（b）中的蛋白质便于纯化，可在所述蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

  标签 残基  序列  Poly-Arg 5-6（通常为5个）  RRRRR  Poly-Hi s 2-10（通常为6个）  HHHHHH  FLAG 8  DYKDDDDK  Strep-tag II 8  WSHPQFEK

  c-myc  10  EQKLISEEDL