[发明专利]一种动物组织样的基因组DNA提取试剂盒

权利要求书

1.一种动物组织样的基因组DNA提取试剂盒，包括：

溶液A：细胞裂解液；溶液B ：6 mol/L的NaCl溶液；溶液C：三氯甲烷；溶液D ：TE缓冲液和蛋白酶K。

2.权利要求1所述一种动物组织样的基因组DNA提取试剂盒的用法，其特征在于：

1）碎化组织样：将动物组织样用剪刀切下20-60 mg，放在一个1.5 ml离心管盖里，加100 μl溶液A，再把组织样剪碎，然后再加入300 μl的溶液A；

2）消化蛋白质：向离心管内加入15 μl的蛋白酶K，上下颠倒摇匀，放于65 °C的振动水浴锅内，水浴2个小时；

3）分离DNA：将水浴后的样品加入200 μl溶液B，然后放在冰块上，再加入500 μl溶液C，上下摇动10分钟，将样品4 oC 离心12000转/分，10分钟；

4）析出DNA：取离心管内的上清液600 μl到新的1.5ML离心管中，加入1000 μl无水乙醇或等体积的异丙醇，摇动离心管直至DNA析出，静置2分钟；将析出DNA的离心管4 oC离心, 12000 转/分，5分钟；

5）洗涤DNA：倒出离心管中溶液后，离心管中再加入1000 μl的70%（体积比）乙醇，充分洗涤；4 oC离心, 12000转/分，2分钟；重复此步骤，洗涤第二次；

6）快速干燥DNA：倒出离心管中溶液，用卫生纸吸走管口残液，离心甩下管壁上的乙醇，用10 ul移液器吸走剩余乙醇，倒置5分钟离心管；

7）溶解DNA：加入130-600 ul的溶液D或ddH₂O，放置4 oC保存过夜，待用。