[发明专利]抗体人源化改造方法

权利要求书

1.抗体的人源化改造的方法，包括如下步骤：

（1）、按照如下Ⅰ或Ⅱ所述方法选择得到人源化抗体模板：

Ⅰ、选择重链可变区和轻链可变区分别与待改造抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列相似性均在50%以上或60%以上的人源化抗体，将其作为预人源化抗体模板；

从所述预人源化抗体模板中选择与待改造抗体的可变区空间结构相似性值最高的人源化抗体作为人源化抗体模板；

Ⅱ、选择满足如下ⅰ）和ⅱ）所示条件的人源化抗体，将其作为预人源化抗体模板；

ⅰ）重链可变区和轻链可变区分别与待改造抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列相似性均在50%以上或60%以上；

ⅱ）重链可变区的框架区和轻链可变区的框架区分别与待改造抗体的重链可变区的框架区和轻链可变区的框架区的氨基酸序列相似性均在50%以上或60%以上；

从所述预人源化抗体模板中选择与待改造抗体的可变区空间结构相似性值最高的人源化抗体作为人源化抗体模板；

所述可变区空间结构为如下a）和/或b）所示：a）重链可变区和轻链可变区一起构成的空间结构；b）重链可变区中的框架区和轻链可变区中的框架区一起构成的空间结构；

（2）、按照如下Ⅲ或Ⅳ所示方法获得被置换后的人源化抗体模板：

Ⅲ、用所述待改造抗体的重链可变区和轻链可变区中的至少一个CDR氨基酸序列置换所述人源化抗体模板中对应的CDR氨基酸序列，获得被置换后的人源化抗体模板；

Ⅳ、用所述待改造抗体的抗原结合区氨基酸序列置换所述人源化抗体模板中对应的抗原结合区氨基酸序列，获得被置换后的人源化抗体模板；

（3）、将所述步骤（2）中的被置换后的人源化抗体模板作为改造后的目的人源化抗体；

（4）用基因工程方法表达得到所述改造后的目的人源化抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，在所述步骤（2）后，所述步骤（3）前，包括如下回变步骤：将所述步骤（2）得到的抗体的框架区的至少一个氨基酸残基替换为所述待改造抗体中相应位置的氨基酸残基，至得到的抗体空间结构稳定，将得到的抗体作为改造后的目的人源化抗体。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述回变步骤中，被替换的氨基酸残基为影响步骤（2）得到的抗体的CDR区结构稳定性或影响步骤（2）得到的抗体的抗原结合区结构稳定性的氨基酸残基；

和/或，所述回变步骤中，被替换的氨基酸残基位于所述步骤（2）得到的抗体的游标区和/或被替换的氨基酸残基位于所述步骤（2）得到的抗体的侧链中距离所述CDR氨基酸残基3埃以内；

和/或，所述方法中，在所述回变后，所述步骤（3）前，包括如下人源突变步骤：将所述回变得到的抗体的框架区内非人源的且不同于所述待改造抗体中相应位置氨基酸的氨基酸残基突变为人源氨基酸残基，将得到的抗体作为改造后的目的人源化抗体。

4.由权利要求1-3中任一所述方法得到的人源化抗体。