[发明专利]一种高银杏萜类内酯含量的银杏达莫注射液的制备方法

权利要求书

1.一种银杏达莫注射液的制备方法，其包括如下步骤：

1)银杏叶的采集、加工、检测与分类；

2)从银杏叶中提取银杏叶萜类内酯提取物；

3)提取银杏叶黄酮提取物；

4)将含银杏总黄酮10g的银杏叶黄酮提取物和2克双嘧达莫加水回流后过滤，制成混合液1；

5)将上述全量混合液1、含银杏总内酯5g的银杏叶萜类内酯提取物、2克双嘧达莫及辅料混合，按常规制剂方法制成银杏达莫注射液，所述银杏达莫注射液中，银杏总黄酮和双嘧达莫的含量除应符合常规要求外，银杏萜类内酯的含量应为0.5～1.2mg/mL。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)具体为：银杏叶的采收期为6月下旬至10月下旬，将鲜叶在产地于60℃以下进行干燥，选用银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯的总含量高于0.35％的银杏叶进行提取。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)具体为：将银杏叶投入到提取装置中，加入7～15倍量药材重量的40～80％的有机溶剂，加热回流提取，其中，有机溶剂选用甲醇、乙醇、丙酮、乙腈中的任意一种，提取1～3小时，共提取1～3次，合并提取液，低温下减压回收溶剂，浓缩干燥，制得银杏叶的有机溶剂粗提物，留下提取后的银杏叶药渣，粗提物加入乙酸乙酯，提取后过滤，得到滤液和乙酸乙酯萃取后的粗提物2；合并滤液，减压滤液回收乙酸乙酯，加入80～100％乙醇溶液，使充分溶解，过滤，滤液上于已处理好的聚酰胺色谱柱，用80～100％乙醇溶液进行洗脱，收集含银杏内酯的流出液和洗脱液，减压浓缩，浓缩液上于氧化铝柱，用无水乙醇进行洗脱，收集含银杏内酯的流出液和洗脱液，减压浓缩，结晶，过滤，干燥，即得银杏叶萜类内酯提取物。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)具体为：将有机溶剂提取后的银杏叶药渣和乙酸乙酯萃取后的粗提物2，加入药渣和粗提物2总重的7～15倍的纯化水，加热回流提取，提取1～3小时，共提取1～3次，合并提取液，减压浓缩至原体积的1/16～1/8，将浓缩液放置、沉淀、离心、过滤，将滤液上于已处理好的大孔吸附树脂柱进行吸附，其中，可选用大孔吸附树脂AB-8、ADS-17、D101、DM130、D201、HPD417、HPD600、HPD722、HZ803、HZ806、HZ841中的任何一种，提取液经充分吸附后，用8～12倍柱体积量的纯化水洗涤，然后用乙醇洗脱，收集含银杏黄酮部分的洗脱液、浓缩至无醇味，然后加入0.5～2倍银杏叶重量的纯化水，搅拌冷却后静置、沉淀、离心、过滤，将滤液浓缩收膏，干燥至含水量在6％以下，粉碎，即得银杏水提物；银杏叶水提物中加入8～12倍重量的体积百分浓度为90％以上的乙醇，搅拌至溶解，过滤，滤液浓缩至无醇味，然后加入10倍浓缩后药液体积的纯化水，搅拌冷却后静置，取上清液，经离心分离后浓缩收膏，真空干燥至含水量在6％以下，粉碎，即得银杏叶黄酮提取物。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)具体为：取含银杏总黄酮10g的银杏叶黄酮提取物和2克双嘧达莫和提取物重量10～15倍重量的纯化水，充分搅拌，混合均匀，调pH值至3.5～5.5，加热回流0.5～1小时，冷却至室温，重调pH值至3.5～5.5，取上清液，用0.2mm的滤膜过滤，滤液再经100000道尔顿以下的超滤膜超滤，滤液高温高压灭菌，放冷，即得制成混合液1，低温贮存。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤5)具体为：将上述全量混合液1、含银杏总内酯5g的银杏叶萜类内酯提取物、2克双嘧达莫和相关辅料，用注射用水完全溶解，其中，辅料为丙二醇、甘油、吐温80、焦亚硫酸钠、维生素C、依地酸钙钠或聚乙二醇400中的一种或几种，调pH值为3.5～5.5，低温冷藏放置，过滤，除热原，制得注射液中间体，经检验合格后，用0.22mm微孔滤膜过滤，滤液灌装，高温高压灭菌，即得银杏达莫注射液，低温贮存。