[发明专利]一种参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素检查方法

说明书

技术领域：

本发明涉及参芎葡萄糖注射液，尤指参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素检查方法。

背景技术：

参芎葡萄糖注射液具有抗血小板凝集，扩张动脉，降低血液粘度，改善微循环，改善心肌供血供氧等作用，是临床常用药。

参芎葡萄糖注射液收录于国家药品标准化学药品地标升国标第12册，原质量标准热原检查方法为家兔法，而家兔法检验结果的准确性与一致性取决于实验动物状况，故对饲养家兔的饲养环境、检测的条件及操作人员都有严格的要求，操作繁琐费时，又不能用于生产过程中的质量监控。

发明内容：

本发明所解决的技术问题在于克服了家兔法检测方法中的不足之处，提供一种参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素检查方法。该方法快速、灵敏，能在保证检测准确的同时，减少检验成本、提高检验效率、方便生产过程监控及检验工作的开展。

本发明所解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现：

一种参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素检查方法，包括如下步骤：

（1）参芎葡萄糖注射液细菌内毒素限值(L)的确定步骤；

（2）鲎试剂灵敏度复核步骤；

（3）干扰试验预试验步骤，确定参芎葡萄糖注射液最小不干扰稀释倍数；

（4）正式干扰试验步骤；

（5）供试品细菌内毒素检测步骤。

在所述步骤（1）中，参芎葡萄糖注射液细菌内毒素限值(L)的确定考虑联合用药，确定限值为1.0EU·mL^-1

在所述步骤（3）中，干扰试验预试验中参芎葡萄糖注射液对应的最大有效稀释倍数为2～32倍。

本发明依据现参照中国药典2010年版二部附录细菌内毒素检查法，对参芎葡萄糖注射液应用鲎试剂进行细菌内毒素检查的可行性做了研究。本发明的参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素检查法代替家兔热原检测方法，具有快速、灵敏的优点，能在保证检测准确的同时，减少检验成本、提高检验效率、方便生产过程监控及检验工作的开展。

下面通过具体实施方式进一步说明本发明。

具体实施方式：

1、实验材料及仪器

鲎试剂（TAL）：湛江博康海洋生物有限公司，规格：0.1mL，批号：1012020，灵敏度：0.25EU·mL^-1；湛江安度斯生物有限公司，规格：0.1mL，批号：1101181，灵敏度：0.25EU·mL^-1。

细菌内毒素工作标准品(WSE)：中国药品生物制品检定所，效价：120EU/支，批号：150601－201072。

细菌内毒素检查用水（BET）：中国药品生物制品检定所，规格：10mL，批号：2008－04。

参芎葡萄糖注射液：贵州景峰注射剂有限公司，规格100mL，批号：1、2、3。

仪器：电热干燥箱、ET－96细菌内毒素凝胶法测定仪、旋涡混合器、微量移液器、无热原吸头、试管、试管架、75%酒精棉球、封口膜、剪刀、砂轮。所用玻璃器皿均以250℃干烤1小时以上。

2、方法和结果

2.1细菌内毒素限值(L)的确定

根据公式L＝K/M，考虑到可能联合用药，最终确定限值为1.0EU·mL^-1。

2.2鲎试剂灵敏度复核

按照中国药典2010年版附录细菌内毒素检查法规定进行鲎试剂的标示灵敏度复核，2批鲎试剂经检查λc与λ一致，结果均符合规定（见表1）。

表1鲎试剂灵敏度复核结果

2.3干扰试验预试验

2.3.1参芎葡萄糖注射液干扰试验稀释倍数的确定

根据计算公式MVD=cL/λ，其中L为参芎葡萄糖注射液的细菌内毒素限值1.0EU·mL^-1，λ为鲎试剂标示灵敏度，目前市售鲎试剂灵敏度λ通常在0.5～0.03EU·mL^-1之间，则参芎葡萄糖注射液对应的最大有效稀释倍数分别为2倍、6倍、12倍、32倍。

2.3.2实验操作